人巨细胞病毒UL88蛋白通过降解MyD88抑制天然免疫激活的新机制

这篇研究揭示了人巨细胞病毒（HCMV）UL88蛋白通过靶向降解天然免疫信号接头蛋白MyD88，抑制宿主免疫激活的分子机制。研究发现，UL88的N端结构域介导MyD88溶酶体降解，阻断NF-κB核转位，从而促进病毒在成纤维细胞和单核细胞间的扩散。该发现为HCMV免疫逃逸策略提供了新见解，对开发抗病毒疗法具有重要意义。

　　

HCMV UL88蛋白调控天然免疫的分子机制

ABSTRACT
人巨细胞病毒（HCMV）编码的皮层蛋白UL88通过降解髓样分化因子88（MyD88）调控宿主天然免疫反应。研究发现，MyD88在HCMV感染早期被强烈诱导，而UL88通过其N端1-181氨基酸与MyD88结合，促进其溶酶体依赖性降解。这一过程抑制了NF-κB核转位和下游炎症因子产生，从而促进病毒在细胞间的传播。

INTRODUCTION
HCMV感染在免疫功能低下人群中可导致严重疾病。尽管对病毒复制机制已有深入研究，但许多非必需基因（如UL88）的功能仍不清楚。MyD88作为TLR（除TLR3外）和IL-1受体家族信号转导的关键接头蛋白，在抗病毒免疫中发挥核心作用。既往研究表明HCMV编码多种免疫逃逸蛋白，但直接靶向MyD88的病毒蛋白尚未被发现。

RESULTS

MyD88在低感染复数下的动态调控
低感染复数（MOI=0.05）感染实验显示，HCMV暴露可快速上调MyD88蛋白水平，这一过程不依赖病毒复制。值得注意的是，UL88缺陷病毒（UL88-STOP和UL88-GalK）感染的细胞中，MyD88蛋白水平显著高于野生型病毒感染组。时间进程实验表明，UL88介导的MyD88下调发生在感染后9-12天，与病毒扩散时间点吻合。

UL88的分子作用机制
通过构建UL88截短体发现，其N端结构域（1-180aa）足以介导MyD88降解。免疫共沉淀证实UL88 N端与MyD88存在特异性相互作用。溶酶体抑制剂氯喹可阻断这一降解过程，而蛋白酶体抑制剂MG132无效，表明UL88通过溶酶体途径降解MyD88。

MyD88对病毒扩散的双向调控
shRNA敲低MyD88显著促进HCMV扩散，而过表达MyD88则抑制病毒传播。有趣的是，MyD88过表达并未上调典型干扰素刺激基因（ISGs），反而下调了MX2、IFITM1等抗病毒基因。研究者发现MyD88通过诱导一种热不稳定性可溶性因子（产生于感染后3-6天）抑制病毒扩散，该因子并非已知的IL-1β或IFN-β。

UL88抑制NF-κB活化
免疫荧光显示，UL88缺陷病毒感染的培养物中，约40%未感染细胞出现NF-κB核转位，而野生型病毒感染组仅2-3%。UL88过表达可完全阻断IL-1β诱导的NF-κB活化，证实其在MyD88信号通路中的抑制作用。

单核-成纤维细胞传播模型
在THP-1单核细胞与HDF成纤维细胞共培养系统中，UL88缺陷病毒的扩散效率显著降低。转录组分析发现，UL88缺陷病毒感染上调了IL-6、IL-1β等促炎因子，同时意外地下调了多数ISGs（如MX1、IFI16），仅RNA外切酶ISG20显著上调。

DISCUSSION
本研究首次阐明HCMV通过UL88靶向降解MyD88的免疫逃逸新机制。不同于典型病毒蛋白通过干扰素通路逃逸免疫，UL88主要调控MyD88依赖性炎症反应。该发现为理解HCMV在髓系细胞中的潜伏感染和再激活提供了新视角，其揭示的可溶性抗病毒因子可能成为新型治疗靶点。

MATERIALS AND METHODS
研究采用TB40/E病毒株及其衍生株（UL88-STOP、UL88-GalK和回复株UL88-Rev），通过Western blot、qPCR阵列、免疫共沉淀和共聚焦显微镜等技术，系统分析了UL88对MyD88的调控机制。单核-成纤维细胞传播实验采用THP-1与HDF共培养体系，通过荧光示踪定量病毒扩散效率。所有统计学分析均采用GraphPad Prism软件完成。