韩国樱花穿孔病相关真菌属多样性研究及其致病性分析

这篇综述系统研究了韩国樱花穿孔病的病原真菌多样性，通过形态学观察、分子生物学鉴定（ITS、LSU、tef1基因测序）和致病性实验，首次证实Alternaria（链格孢属）、Diaporthe（间座壳属）、Epicoccum（附球菌属）和Botryosphaeria（葡萄座腔菌属）是主要致病菌群，揭示了病原分布的区域差异性（PERMANOVA分析p<0.05），为樱花病害防控提供了新依据。

　　

摘要

樱花树（Prunus × yedoensis和P. serrulata var. spontanea）是韩国最重要的景观树种，占行道树比例的16.6%。然而褐斑穿孔病严重影响其观赏价值与光合作用，传统认为Mycosphaerella cerasella是主要病原，但本研究通过全国范围采样（18个地区6个省份），发现Alternaria、Diaporthe、Epicoccum和Botryosphaeria四大类真菌才是关键致病菌。

材料与方法

样本采集：2024年5-6月在城乡区域采集具典型穿孔症状的樱花叶片，保存于4°C。
病原分离：采用PDA+2%蔗糖培养基，27°C培养后纯化457株真菌，按菌落特征分为Type 1-4四类。
形态鉴定：Type 1（Alternaria）菌落呈杏色至深褐色，产多细胞分生孢子（25μm）；Type 2（Diaporthe）形成透明α（6μm）和β（30μm）型分生孢子；Type 3（Epicoccum）分泌橙色色素；Type 4（Botryosphaeria）菌丝边缘不规则。
分子鉴定：通过ITS、LSU/tef1多基因系统发育分析，160株代表性菌株被鉴定为A. alternata（23株）、A. tenuissima（17株）、D. eres（36株）、E. nigrum（40株）和B. dothidea（40株）。

结果

致病性验证：伤口接种实验显示，四类真菌均能诱发叶片坏死，但症状各异：Alternaria形成不规则褐斑（图5A），Diaporthe产生同心轮纹（图5B），Epicoccum病斑最小（图5C），Botryosphaeria伴随黑色子实体（图5D）。
区域分布：Gyeongsangbuk-do的Alternaria占比70%，而Botryosphaeria在Chungcheongbuk-do超50%（图6A）。PCoA分析表明城乡间病原组成差异显著（p=0.031），可能与杀菌剂使用差异有关。

讨论

本研究颠覆了M. cerasella为单一病原的传统认知，首次证实四大真菌属协同致病。值得注意的是，Epicoccum nigrum在韩国樱花上的致病性为全球首次报道。区域分布差异提示环境或农业措施可能影响病原群落，未来需结合杀菌剂抗性基因检测深入解析。研究为樱花病害精准防控提供了重要靶点。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献内容，专业术语如PERMANOVA、ITS等均按原文格式标注）