X连锁视网膜劈裂症中RS1基因新型缺失-插入变异的发现与机制解析

本研究报道一例携带RS1基因新型缺失-插入变异的X连锁视网膜劈裂症（XLRS）患者。来自日本慈惠会医科大学的研究团队通过外显子测序技术，结合PCR和Sanger验证，首次发现该基因第4外显子区域发生453 bp缺失并伴随15 bp插入。创新性利用反向基因CDKL519-20外显子覆盖度分析，精准解析了该结构变异特征，为XLRS分子诊断提供了新技术路径。

　　

在眼科遗传病领域，科学家们揭开了一例特殊病例的分子面纱。一位20岁日本男性因视力下降就诊，临床检查呈现典型X连锁视网膜劈裂症（XLRS）特征：眼底镜显示黄斑区视网膜层间分裂，光学相干断层扫描（OCT）清晰捕捉到黄斑囊样改变，全视野视网膜电图（ERG）则展现出标志性的负向波形——暗适应3.0反应中b波振幅较a波显著降低。

分子侦探工作随后展开。外显子测序意外发现RS1基因（位于Xp22.13）第4外显子神秘"消失"。更精妙的是，该外显子恰好嵌套在反向排列的CDKL5基因第19内含子中。通过CDKL5_19-20外显子覆盖度分析，研究者排除了大片段缺失的可能性。后续PCR扩增显示患者存在异常小片段（预期野生型为5,295 bp），Sanger测序最终锁定变异本质：RS1基因第4外显子区域发生精准的453 bp缺失，并在断点处插入15 bp新序列（图1c）。这种新型缺失-插入变异经HGMD和ToMMo数据库确认属全球首次报道。

该变异虽导致蛋白质截断，但患者表现为相对温和的表型——最佳矫正视力维持在0.7-0.8（Snellen 20/28-20/25），且未出现周边视网膜劈裂。这呼应了既往研究结论：在XLRS中，截断变异与错义变异的临床严重度并无必然关联。

技术层面，本研究突破传统PCR检测局限，首次证实外显子测序不仅能捕捉单核苷酸变异，还可有效识别RS1基因的外显子缺失。更具创意的是，通过分析相邻CDKL5基因的外显子覆盖度，为精准界定复杂结构变异提供了新策略（图1a）。值得注意的是，CDKL5外显子完整保留的验证结果，也排除了该神经发育障碍相关基因的连锁异常。

这项发现为XLRS的基因诊断工具箱增添了新武器，尤其对占RS1变异10.2%却难以检测的结构变异（如本研究的缺失-插入类型）具有重要意义。当临床遇到疑似病例但常规检测阴性时，外显子测序结合反向基因覆盖度分析，或将成为破解谜题的关键钥匙。