弓形虫减毒活疫苗与灭活疫苗的免疫保护效果比较研究：基于γ射线辐照的本地强毒株评估

本研究针对弓形虫病疫苗开发难题，通过γ射线辐照技术（0.25 KGy和1.5 KGy）分别制备本地强毒株的减毒活疫苗和灭活疫苗，系统评估了其对小鼠急性弓形虫病的免疫保护效果。结果显示减毒活疫苗组（0.25 KGy）诱导了更强的IFN-γ、IL-12和IL-17细胞因子反应及CD4+/CD8+ T细胞应答，生存时间显著延长至67.8天（p<0.05），肝脏印片中未见速殖子，为开发安全有效的弓形虫病疫苗提供了新策略。

　　

弓形虫病是由专性细胞内寄生原虫弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的人畜共患病，全球约50%人口感染。当前唯一商用疫苗Toxovax（S48减毒株）存在成本高、副作用强等局限，而化学药物治疗无法清除慢性包囊。更棘手的是，不同基因型虫株的免疫原性差异使得广谱疫苗开发举步维艰。面对这些挑战，埃及国家研究中心（National Research Centre）兽医研究所的科研团队在《AMB Express》发表了一项突破性研究，通过γ射线辐照技术开发新型疫苗，为防控弓形虫病提供了创新解决方案。

研究采用0.25 KGy和1.5 KGy γ射线分别处理从埃及本地绵羊分离的强毒株速殖子，制备减毒活疫苗和灭活疫苗。通过小鼠三剂量免疫方案（间隔2周）评估保护效果，最终用2,500个RH HXGPRT(-)株速殖子攻毒。关键技术包括：γ射线辐照剂量优化、ELISA检测特异性IgG抗体、流式细胞术分析CD4⁺/CD8⁺ T细胞亚群、细胞因子（IFN-γ/IL-12/IL-17）定量检测，以及肝脏/脾脏组织病理学分析。

【生存时间与寄生虫负荷】
减毒活疫苗组平均生存时间达67.8±26.4天，显著高于灭活疫苗组（8.3±0.2天）和感染对照组（6.6±0.2天）（p<0.05）。攻毒后6个月仍有57.1%存活且脑部未见包囊。腹膜液速殖子计数显示减毒组寄生虫减少率达99.8%，肝脏印片完全未见速殖子。

【免疫应答特征】
减毒活疫苗诱导了显著的Th1型免疫反应：
• 血清IFN-γ和IL-12在免疫51天达峰值（较对照组高3-4倍，p<0.05）
• CD8⁺ T细胞浸润较灭活疫苗组增加2.3倍（IHC证实）
• 特异性IgG抗体水平在攻毒后升高3倍
组织病理显示减毒组肝脏结构正常，仅见轻度炎性细胞浸润，而灭活疫苗组仍见速殖子伪囊和广泛坏死。

【温度安全监测】
首次免疫后减毒组体温短暂升高至37.7±0.28°C（p<0.05），后续剂量未引起显著变化，证实疫苗安全性。

这项研究首次系统比较了γ射线辐照制备的两种疫苗形式，证实0.25 KGy减毒活疫苗能诱导更持久的细胞/体液免疫应答。其创新性体现在：①选用与自然流行株相似的本地强毒株，提高疫苗覆盖范围；②精确控制辐照剂量平衡安全性与免疫原性；③证实减毒株不形成组织包囊的关键优势。该策略为开发适用于家畜和人类的弓形虫病疫苗提供了重要理论依据和实践路径，尤其对解决发展中国家弓形虫病防控难题具有突出价值。