靶向RLIP蛋白：卵巢癌治疗新策略的突破性研究

本研究针对卵巢癌(OC)治疗中化疗耐药的关键难题，聚焦Ral相互作用蛋白(RLIP/RalBP1)的调控机制。研究人员通过抗体抑制和反义核酸技术靶向RLIP，证实其下调可显著诱导OC细胞凋亡，并与卡铂(carboplatin)产生协同效应。实验在OVCAR8异种移植模型中验证了RLIP靶向治疗可抑制肿瘤生长且无系统毒性，为克服OC耐药提供了新靶点。

　　

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤中最致命的类型，约70%患者确诊时已进展至晚期，且化疗耐药导致的复发率居高不下。当前标准治疗方案卡铂联合紫杉醇虽有一定效果，但肿瘤细胞通过激活PI3K/Akt等生存通路和上调药物外排蛋白产生耐药性。其中，Ral相互作用蛋白(RLIP/RalBP1)因兼具谷胱甘肽结合物(GS-E)转运功能和抗凋亡特性，成为逆转耐药的新突破口。

美国希望之城国家医疗中心贝克曼研究所(Beckman Research Institute of City of Hope)的研究团队在《Journal of Ovarian Research》发表研究，系统论证了RLIP在卵巢癌治疗中的关键作用。通过构建涵盖A2780、OVCAR8等9种OC细胞系的实验体系，结合裸鼠异种移植模型，发现：1）RLIP在OC细胞中高表达，其抗体抑制或反义核酸(antisense)敲降均可独立诱导凋亡；2）RLIP耗竭使卡铂IC₅₀降低3-5倍，显著增强化疗敏感性；3）机制上，RLIP通过调控PI3K/Akt和Rac1/Arf6信号网络影响肿瘤迁移与存活。

研究采用四大关键技术：1）磷酸硫代反义核酸靶向RLIP mRNA的510-555nt区域；2）DNP-SG亲和层析纯化重组RLIP蛋白；3）TUNEL法和Transwell实验分别检测凋亡和侵袭；4）OVCAR8异种移植模型评估体内疗效。

主要结果

1. RLIP靶向剂与卡铂协同抑制OC细胞活性

   MTT实验显示，40μg/mL RLIP抗体或10μg/mL反义核酸处理48小时，使OC细胞存活率下降60-80%，而正常血管细胞(HUVEC/HAVSMC)不受影响。与卡铂联用产生显著协同效应（组合指数<0.3）。

1. RLIP耗竭的体内外抗肿瘤效应

   在C57BL/6小鼠中，单次腹腔注射0.2mg RLIP反义核酸可使肝、肾等组织的RLIP蛋白水平在48小时内降至0.01%（ELISA验证）。异种移植模型显示，RLIP抗体(4mg/kg)联合卡铂(20mg/kg)治疗8周后，肿瘤体积缩小78%，且无体重减轻等毒性。

2. 双重机制调控凋亡与转移

   Western blot分析发现，RLIP抑制导致促凋亡蛋白Bax上调5倍，而细胞周期蛋白(cyclin B1/CDK4)和转移标志物(vimentin)下降60%。TUNEL实验证实，联合治疗组凋亡细胞增加8倍（p<0.02）。

结论与意义

该研究首次阐明：1）RLIP是OC细胞依赖的"生存枢纽"，通过外排GS-E和化疗药物维持氧化应激平衡；2）其靶向抑制可同时阻断PI3K/Akt生存信号和Rac1介导的转移途径；3）抗体与反义核酸的等效性提示RLIP的转运功能是其抗凋亡的核心。这一发现为克服卵巢癌耐药提供了新策略——针对RLIP的抗体偶联药物(ADC)或可成为继PARP抑制剂后的突破性疗法。

研究局限性在于尚未解析RLIP与GS-E的精确结合域，且长期毒性需进一步评估。但团队已启动相关临床试验(NCT05224414)，推动这一靶点从基础向临床转化。