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猪源嗜麦芽窄食单胞菌抗体检测间接ELISA方法的建立及流行病学分析
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月13日 来源:Veterinary Research Communications 1.8
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为解决猪群中嗜麦芽窄食单胞菌(S. maltophilia)缺乏诊断方法的难题,研究人员首次以重组磷脂酶C(rPLC)蛋白为包被抗原,建立了一种高特异性(无交叉反应)、高灵敏度(1:1600)的间接ELISA方法。该方法重复性优异(变异系数<10%),临床检测305份猪血清显示阳性率达12.01%,提示该菌在猪群中的流行可能被严重低估,为兽医领域提供了重要的流行病学监测工具。
嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,S. maltophilia)是一种全球分布的条件致病菌,可导致免疫力低下人群发生致死性肺炎和菌血症。在兽医领域,该菌常引起猪呼吸道感染或混合感染,但由于缺乏特异性诊断方法,其流行情况长期被忽视。
研究团队采用嗜麦芽窄食单胞菌SMFZ-01株的重组磷脂酶C(recombinant PLC,rPLC)蛋白作为包被抗原,通过棋盘滴定法优化建立间接ELISA体系。最终确定最佳条件:rPLC包被浓度2.5 μg/mL,血清稀释度1:400,辣根过氧化物酶标记IgG(IgG-HRP)二抗稀释度1:2500。该方法展现出色性能——检测灵敏度达1:1600,与其它猪常见病原阳性血清无交叉反应,批内批间变异系数均低于10%。
通过检测305份临床猪血清样本,间接ELISA检出阳性率12.01%,而巢式PCR(nested PCR)检出率高达29.87%。这一差异暗示猪群中可能存在大量隐性感染个体。该研究不仅填补了兽医领域嗜麦芽窄食单胞菌血清学检测的技术空白,更揭示了该菌在养猪场的潜在流行风险,为制定防控策略提供了重要科学依据。
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