葡萄牙东北部家畜与野生动物中克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)的流行证据及其跨境传播风险

本研究针对葡萄牙东北部地区因克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)致死的病例，首次系统调查了该地区家畜（牛、羊、山羊）和野生马鹿的血清抗体流行率。通过ELISA和间接免疫荧光法(IFT)检测，发现牛群阳性率高达38.29%，马鹿达60%，证实CCHFV在伊比利亚半岛的活跃传播。研究为跨境防控提供关键数据，发表于《Scientific Reports》。

　　

克里米亚-刚果出血热(CCHF)是一种致死率高达62%的蜱媒病毒性疾病，近年来其地理分布持续扩大。2024年葡萄牙布拉干萨区一名83岁男性因CCHF死亡，暴露出伊比利亚半岛的防控漏洞。更令人担忧的是，西班牙边境地区同期也报告了人类病例，但病毒在动物宿主中的传播动态尚不明确。

为揭示病毒传播链，葡萄牙国家农业与兽医研究所(INIAV)联合多家机构开展了一项突破性研究。研究人员利用该国蓝舌病病毒(BTV)监测项目的存档样本，对东北部5个行政区的94头牛、30只羊、4只山羊及10头马鹿进行血清学筛查。通过商业ELISA试剂盒(IDVET)检测发现，牛群总体抗体阳性率达38.29%，其中瓜尔达区农场阳性率高达61.82%；马鹿阳性率更达60%，显著高于既往葡萄牙羊群0.4%的阳性记录。间接免疫荧光试验(IFT)进一步验证了高滴度阳性样本的可靠性，在转染CCHFV-GPC(糖蛋白前体)和CCHFV-N(核衣壳蛋白)抗原的细胞中观察到特异性荧光信号。

研究采用三项关键技术：1) 基于16S rDNA测序的蜱种鉴定技术，确认采集的15只蜱属于Dermacentor marginatus和Rhipicephalus bursa物种；2) 双抗原ELISA法检测血清抗体，样本阳性阈值设定为S/P值>30%；3) RT-qPCR检测病毒RNA（靶向S节段核蛋白基因），尽管所有血液和蜱样本核酸检测均为阴性。

CCHFV血清流行率
牛群抗体阳性率呈现明显地域差异，毗邻西班牙的瓜尔达区成为热点疫区。值得注意的是，24头ELISA阳性牛在两个月后复检仍保持抗体阳性，提示持续暴露风险。马鹿的高阳性率(60%)与西班牙研究数据吻合，证实野生有蹄类动物在病毒传播中的关键作用。

蜱媒调查结果
尽管在阳性农场采集的蜱中未发现主要媒介Hyalomma属物种，但研究者指出采样时间(9-10月)可能错过蜱类活动高峰。乙醇保存导致的核酸降解也可能是PCR阴性结果的原因之一。

讨论与意义
该研究首次证实CCHFV在葡萄牙牛群和马鹿中的广泛传播，血清学数据表明病毒可能已在该地区隐匿循环多年。牛群作为无症状宿主，其跨农场流动可能加速病毒扩散；而马鹿作为Hyalomma lusitanicum蜱的主要宿主，构成野生动物传播库。研究建议：1) 将牛群血清学监测纳入现有动物疫病监控体系；2) 加强边境地区蜱媒生态学研究；3) 对畜牧业从业者开展防护教育。这些发现为理解伊比利亚半岛CCHFV生态学提供新视角，也为WHO优先疾病防控策略制定提供了关键证据。