IL-10工程化巨噬细胞：靶向调控肾钙质沉积症微环境的新型免疫治疗策略

本研究创新性地构建了持续分泌IL-10的工程化巨噬细胞（Mφ-IL10），通过尾静脉移植显著改善了乙醛酸诱导的小鼠肾钙质沉积症模型。实验证实Mφ-IL10能促进巨噬细胞M2极化（CD206+CD86-），抑制NLRP3炎症小体激活，减少草酸钙（CaOx）晶体沉积，并缓解肾小管损伤。相比重组IL-10直接注射，该疗法具有生物相容性好、作用持久的优势，为肾钙质沉积症的免疫治疗提供了新思路。

　　

工程化巨噬细胞的构建与验证

研究团队通过慢病毒载体成功构建了持续分泌白细胞介素10（IL-10）的RAW264.7巨噬细胞系（Mφ-IL10）。免疫荧光、qRT-PCR和ELISA检测证实，Mφ-IL10组IL-10表达量显著高于空载体对照组（552.3 pg/mL vs 1 pg/mL）。值得注意的是，流式细胞术显示CD206⁺CD86^-的M2型巨噬细胞比例未出现自发升高，表明工程化改造未影响巨噬细胞的基础极化状态。

体外实验揭示治疗机制

采用transwell共培养系统发现，Mφ-IL10培养上清可显著提升RAW264.7细胞中Ym-1和Arg-1等M2标志物的mRNA表达，同时抑制IL-6、TNF-α和IL-1β等促炎因子分泌。在钙氧酸盐单水合物（COM）晶体刺激实验中，经Mφ-IL10预处理的巨噬细胞表现出更强的晶体粘附能力和溶酶体（Lyso-Tracker阳性）激活水平，证实其促进晶体清除的生物学效应。

动物模型治疗效果评估

在乙醛酸（75 mg/kg/day×6天）诱导的肾钙质沉积症小鼠模型中，单次尾静脉注射Mφ-IL10（2.5×10⁵ cells/只）展现出显著疗效。与重组IL-10直接注射相比，Mφ-IL10治疗组小鼠体重下降更缓，血尿素氮（BUN）和肌酐水平改善更明显。偏振光显微镜和Von Kossa染色显示肾脏CaOx晶体沉积减少约60%，骨桥蛋白（OPN）表达显著下调。

微环境调控机制解析

免疫组化显示Mφ-IL10组肾脏IL-10阳性区域扩大而IL-1β减少。流式细胞术证实治疗组M1/M2巨噬细胞比例显著降低。在TCMK-1肾小管上皮细胞共培养模型中，Mφ-IL10预处理使COM诱导的活性氧（ROS）水平和乳酸脱氢酶（LDH）释放降低约50%，Calcein-PI染色显示细胞死亡率显著下降。

临床转化潜力与局限性

该研究首次证实巨噬细胞移植治疗肾钙质沉积症的可行性，利用巨噬细胞天然趋化特性实现IL-10的靶向递送。相比传统给药方式，工程化巨噬细胞可在病灶部位持续分泌细胞因子，且剂量受微环境调控。但研究存在观察周期较短（7天）、未评估长期安全性等局限，未来需优化细胞存活时间和给药方案。

这项突破性工作为肾钙质沉积症的免疫治疗提供了新范式，通过精准调控肾脏局部炎症微环境，同时实现晶体清除和组织保护的双重功效，对慢性肾脏病（CKD）的防治也具有重要参考价值。