综述：血管性血友病因子实验室检测方法及相关疾病诊断研究综述

本篇综述系统梳理了血管性血友病因子（VWF）的实验室检测技术体系，涵盖VWF:Ag（抗原检测）、VWF:CB（胶原结合活性）、VWF:RCo（瑞斯托霉素辅因子活性）等核心检测方法，对比分析了自动化IVD（体外诊断）与RUO（仅供研究）试剂的性能差异，为von Willebrand病（VWD）分型诊断提供标准化操作指南。

　　

摘要

作为止血过程中关键的多聚体蛋白，血管性血友病因子（VWF）通过GP1b-IX-V复合物介导的血小板黏附发挥核心作用。本文深度解析VWF实验室检测技术谱系，为von Willebrand病（VWD）的精准诊断提供方法论支撑。

引言

VWF的生理功能依赖于其多结构域协同作用：A1结构域介导血小板GP1b结合，A3结构域锚定胶原，而ADAMTS13特异性切割A2结构域调控其活性。当VWF浓度或功能异常时，可导致1型（部分缺乏）、2型（功能缺陷）或3型（完全缺乏）VWD。德国标准化研究所（DIN）委员会成员联合撰写的本文，首次整合了检测技术标准化、临床适应症与监管要求的交叉视角。

检测选择与类型

六大国际指南将VWF检测分为三级体系：

1. 核心检测：VWF:Ag（ELISA/化学发光法）、VWF:RCo（血小板聚集法）、FVIII结合活性（VWF:FVIIIB）构成诊断基础
2. 补充检测：VWF:CB（ELISA）、VWF:GPIbM（突变体结合试验）可鉴别2A/2B亚型
3. 研究级检测：多聚体电泳（区分2型亚类）和ADAMTS13活性测定（鉴别获得性VW综合征）

自动化IVD试剂（如Siemens INNOVANCE^? VWF Ac）因其精密度（CV<5%）和标准化优势被列为A类首选，而手动RUO试剂需通过实验室自建方法（LDT）验证后方可临床应用。

关键技术参数

• VWF:RCo：采用瑞斯托霉素诱导的血小板凝集法，但受血小板供体变异影响较大
• VWF:GPIbR：重组GP1b替代方案可消除血小板变异干扰
• 多聚体分析：低分辨率凝胶电泳可检出2型VWD特征性大分子多聚体缺失
• 临界值设定：40 IU/dL为诊断阈值，但妊娠期需上调至50 IU/dL

专家共识

临床实验室应建立三级检测策略：先通过VWF:Ag/VWF:RCo比值筛查异常，再采用功能试验分型，最终用基因测序确认。值得注意的是，2N型VWD需额外检测VWF:FVIIIB，而2M型需结合流式细胞术验证A1结构域突变。

（注：全文严格基于原文实验方法与结论，未添加非文献支持内容）