尼罗罗非鱼血清IgM特性分析及抗原特异性IgM间接ELISA检测方法的建立与应用

来自国内的研究人员针对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫监测需求，通过硫酸铵沉淀和蛋白A层析纯化血清免疫球蛋白M(IgM)，采用天然梯度PAGE(878.4 kDa)和SDS-PAGE(重链82.2 kDa/轻链28.2 kDa)表征其结构，制备兔抗IgM多克隆抗体并验证其与印度主要鲤科鱼类的交叉反应性。成功建立两种间接ELISA：血清总IgM定量检测(1.57±0.07 mg/ml)及灭活阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)免疫后90天内血清/皮肤黏液抗原特异性IgM动态监测方法，为鱼类疫苗效力评估提供新工具。

　　

这项突破性研究揭秘了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫系统的核心武器——血清免疫球蛋白M(IgM)的分子特征。科研团队采用硫酸铵沉淀结合蛋白A层析的"黄金组合"纯化技术，像精准的分子剪刀般将IgM从复杂血清中分离。天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)捕捉到878.4 kDa的完整IgM分子，而变性条件下的SDS-PAGE则解构出82.2 kDa重链和28.2 kDa轻链的蛋白质蓝图。

更令人振奋的是，研发的兔抗尼罗罗非鱼IgM多克隆抗体展现出"火眼金睛"般的特异性，不仅能识别目标IgM，还与印度主要鲤科鱼类(IMCs)的IgM产生交叉反应，暗示着鱼类免疫系统的进化保守性。基于此抗体构建的双重检测体系大显身手：标准间接ELISA测得血清总IgM浓度达1.57±0.07 mg/ml；而针对灭活阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)抗原设计的动态监测ELISA，则像"免疫雷达"般持续追踪疫苗接种后90天内血清和皮肤黏液中的抗原特异性IgM波动。

这项技术突破为水产养殖业装上了"免疫监测天眼"，使得评估鱼类疫苗效力就像检测人类抗体般精准便捷。皮肤黏液这种非损伤性样本的检测应用，更是为集约化养殖的疾病防控提供了"无痛体检"新方案，预示着鱼类免疫学研究正向着更精细、更实用的方向跃进。