多齿 Athyrium 多糖的结构表征、免疫活性及作用机制研究：基于 Dectin-2/SYK/MAPK/非经典 NF-κB 通路的免疫调节新发现

本研究针对天然免疫调节剂开发需求，从多齿 Athyrium (Doll.) Ching 中提取纯化水溶性多糖(AFP)，通过FT-IR、UV-Vis、CD、SEM、AFM、CR结合实验及NMR等多维技术解析其→4-β-D-Manp-(1→和β-D-Glcp-(1→双重复单元结构，发现AFP通过Dectin-2/SYK/MAPK/non-classical NF-κB通路显著增强正常及免疫抑制小鼠免疫活性，为开发新型植物源免疫调节剂提供理论依据。

　　

在免疫调节治疗领域，寻找高效低毒的天然免疫调节剂一直是研究热点。传统化疗药物往往伴随严重副作用，而植物多糖因其独特的生物相容性和多靶点作用特点，展现出巨大开发潜力。多齿 Athyrium (Doll.) Ching 作为传统药用蕨类植物，其多糖成分的免疫活性机制尚未明确，这严重制约了该药用资源的深度开发。

为破解这一科学问题，国内某研究机构的研究团队在《Journal of Carbohydrate Chemistry》发表重要研究成果。研究采用水提醇沉结合柱层析技术，从多齿 Athyrium 中获得高纯度多糖组分AFP，通过多尺度结构解析与功能验证，首次阐明其双重糖链结构特征及独特免疫调节机制。

关键技术方法包括：傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析官能团，紫外-可见光谱(UV-Vis)检测纯度，圆二色谱(CD)测定构象，扫描电镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)观察形貌特征，刚果红(CR)实验检测三螺旋结构，高效液相色谱(HPLC)分析单糖组成，凝胶渗透色谱(GPC)测定分子量，以及一维/二维核磁共振(1D/2D NMR)解析精细结构。免疫活性评价采用正常和环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠模型。

【结构表征】

1D/2D NMR分析揭示AFP含有两个特征性重复单元：→4-β-D-Man_p-(1→4)-β-D-Xyl_p-(1→4)-β-D-Xyl_p-(1→2)-β-D-Gal_p-(1→构成的甘露糖-木糖-半乳糖主链，以及β-D-Glc_p-(1→4)-β-D-Glc_p-(1→4)-β-D-Glc_p-(1→2)-β-D-Gal_p-(1→的葡聚糖分支。SEM显示其表面呈不规则片层结构，AFM观测到高度约0.8nm的单分子链。

【免疫活性】

在50-200μg/mL浓度范围内，AFP能剂量依赖性促进巨噬细胞NO和细胞因子分泌。动物实验显示，AFP治疗组免疫抑制小鼠的脾指数、胸腺指数及血清IgG水平较模型组显著提高(p<0.01)，效果优于阳性对照左旋咪唑。

【机制研究】

基因敲除实验证实Dectin-2受体是AFP的关键作用靶点。Western blotting显示AFP可激活SYK激酶，进而磷酸化MAPK家族成员ERK1/2、JNK和p38。特别值得注意的是，AFP选择性激活非经典NF-κB通路而非经典通路，这通过p52核转位实验得到验证。

该研究首次系统阐明多齿 Athyrium 多糖的双重复单元结构特征，创新性发现其通过Dectin-2/SYK/MAPK/non-classical NF-κB信号轴发挥免疫调节作用。这种对非经典NF-κB通路的特异性激活模式，为开发靶向性更强的免疫调节剂提供了新思路。研究成果不仅丰富了植物多糖构效关系理论，也为传统药用蕨类的现代化开发提供了科学依据，具有重要的学术价值和临床应用前景。