大黄酸通过调控miR-328-3p/TCF7L2/FABP4轴抑制骨肉瘤进展的机制研究

为解决骨肉瘤(OS)治疗中化疗耐药和靶向治疗缺乏的难题，大连医科大学第二医院团队开展大黄酸(RH)抗肿瘤机制研究。该研究首次揭示RH通过上调miR-328-3p抑制TCF7L2转录因子，进而下调FABP4表达，显著抑制OS细胞增殖、迁移和干细胞特性，在体内外均表现出显著抗肿瘤效果。这项发表于《Biochemical Pharmacology》的研究为OS提供了新的治疗靶点和天然药物候选方案。

　　

骨肉瘤这个"青少年骨癌杀手"长期困扰着医学界——尽管手术联合化疗使非转移患者5年生存率达70%，但一旦复发转移，生存率骤降至20%。更棘手的是，过去40年疗效始终未能突破，传统化疗的毒副作用和耐药性如同悬在患者头上的达摩克利斯之剑。在这样的背景下，源自中药大黄的天然化合物大黄酸(RH)进入了科学家视野，其先前在肝癌、胰腺癌等肿瘤中展现的多通路抗癌特性令人期待，但对抗骨肉瘤的机制仍是未解之谜。

大连医科大学第二医院的研究团队在《Biochemical Pharmacology》发表的重要研究揭开了这一谜底。他们发现RH能通过一条全新的分子通路——miR-328-3p/TCF7L2/FABP4轴，对骨肉瘤实施"精准打击"。这项研究不仅首次阐明RH在骨肉瘤中的具体作用靶点，更揭示了脂代谢关键蛋白FABP4在骨肉瘤进展中的核心地位，为开发低毒高效的天然药物组合方案提供了理论依据。

研究团队运用CCK-8法检测细胞活力、Transwell实验分析迁移侵袭能力、肿瘤球形成实验评估干细胞特性，并通过裸鼠移植瘤模型验证体内效果。分子机制方面采用双荧光素酶报告基因验证miR-328-3p与TCF7L2的靶向关系，染色质免疫沉淀(ChIP)证实TCF7L2对FABP4启动子的调控作用。

【RH抑制OS细胞增殖迁移并诱导死亡】

剂量依赖性实验显示，RH处理24小时可显著降低143B、MNNG/HOS和U2OS等骨肉瘤细胞系活力。更令人振奋的是，RH不仅能抑制单层细胞的克隆形成，还能破坏肿瘤球的立体生长，暗示其对肿瘤干细胞的抑制作用。Transwell实验证实RH处理后的细胞穿膜能力下降超60%，动物实验中肿瘤体积缩小约70%。

【FABP4是RH的关键作用靶点】

当研究人员敲低FABP4时，RH的促凋亡效果被放大；而过表达FABP4则产生相反效果。特别值得注意的是，单独敲除FABP4就足以抑制肿瘤生长，这使其成为极具潜力的治疗靶标。

【TCF7L2转录调控FABP4表达】

通过生物信息学分析和ChIP实验，团队首次证实转录因子TCF7L2能直接结合FABP4启动子区域。当TCF7L2被抑制时，FABP4表达水平随之下降，RH的抗癌效果同步增强，形成级联调控效应。

【miR-328-3p介导RH对TCF7L2的调控】

机制研究中最精彩的发现是：RH能显著上调miR-328-3p的表达，这个微小RNA如同"分子刹车"般抑制TCF7L2蛋白翻译。双荧光素酶报告基因实验确认miR-328-3p与TCF7L2 mRNA的3'UTR存在特异性结合。

这项研究构建了完整的RH→miR-328-3p↑→TCF7L2↓→FABP4↓→骨肉瘤抑制的分子通路。其重要意义在于：一方面揭示了FABP4这个脂代谢关键分子在骨肉瘤发生中的新角色，另一方面证实传统中药活性成分可通过多靶点协同发挥抗癌作用。特别值得关注的是，RH与现有化疗药物联用可能实现"减毒增效"，这对改善青少年患者的长期生存质量具有重要临床价值。研究团队指出，针对miR-328-3p/TCF7L2/FABP4轴的靶向干预，可能成为突破骨肉瘤治疗瓶颈的新策略。