基于γδ T细胞调控的EGCG释放纳米纤维支架促进伤口愈合研究

为解决PROTAC技术面临的生物利用度低、脱靶毒性和稳定性差等问题，研究人员开发了负载CDK9降解剂THAL-SNS-032的脂质纳米颗粒（LBNPs），包括脂质体（cLIP-THAL）和固体脂质纳米粒（SLN-THAL）。通过体外实验证实，cLIP-THAL在乳腺癌细胞中展现出与游离药物相当的抗增殖活性，且毒性更低，同时通过FLIM成像揭示了胆固醇对药物控释的关键作用。该研究为PROTAC的纳米载体优化提供了新策略，发表于《Biomaterials》。

　　

近年来，蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC）技术因其能靶向降解"不可成药"蛋白的特性，成为肿瘤治疗的新希望。然而，这类大分子药物普遍存在口服吸收差、脱靶毒性强等问题，尤其是CDK9降解剂THAL-SNS-032（THAL）虽在乳腺癌模型中显示疗效，却因胃肠道毒性阻碍临床转化。西班牙卡斯蒂利亚-拉曼查大学（Universidad de Castilla-La Mancha）与西班牙肿瘤研究中心（CIBERONC）的联合团队创新性地将THAL封装于脂质纳米颗粒（LBNPs），通过纳米载体技术突破上述瓶颈，相关成果发表于《Biomaterials》。

研究采用溶剂注入法和乳化扩散法制备了三种LBNPs：含胆固醇脂质体（cLIP-THAL）、无胆固醇脂质体（LIP-THAL）及固体脂质纳米粒（SLN-THAL）。借助动态光散射（DLS）、透射电镜（TEM）和荧光寿命成像（FLIM）等技术，系统评估了纳米颗粒的理化特性及细胞摄取机制。

3.1 纳米颗粒的构建与表征

通过优化配方获得粒径约100-200 nm的单分散纳米颗粒，其中cLIP-THAL的包封率达95.06%。差示扫描量热（DSC）显示Pluronic F-127的结晶度保留（熔点53.6-55.6°C），而傅里叶变换红外光谱（FT-IR）证实胆固醇可增强制剂热稳定性。

3.2 体外药效评估

在MCF7（Luminal A）和MDA-MB-231（三阴性）乳腺癌细胞中，cLIP-THAL的IC₅₀低于游离THAL，且对正常角质细胞HaCaT毒性更低。Western blot证实其保留CDK9降解能力，但Matrigel 3D侵袭实验显示其抑制效果优于游离药物（p<0.01），提示存在非CDK9依赖的通路激活。

3.3 作用机制解析

流式细胞术揭示cLIP-THAL在MDA-MB-231中引发G2/M期阻滞（24 h），在MCF7中则显著增加凋亡细胞（72 h时AV⁺/PI⁺达38%）。FLIM动态监测显示含胆固醇的cLIP能延缓DiD荧光探针释放（寿命分布1.7→1.9 ns），证实胆固醇可减少内吞过程中的药物泄漏。

这项研究首次将CDK9 PROTAC转化为临床可行的纳米药物，证实脂质载体不仅能维持药物活性，还可通过调控释放动力学增强疗效。特别是cLIP-THAL展现出的"减毒增效"特性，为克服PROTAC的毒性瓶颈提供了新思路。未来研究可进一步探索纳米载体对肿瘤微环境中γδ T细胞等免疫细胞的调控作用，推动PROTAC技术与免疫疗法的协同应用。