高灵敏度自动化检测新标杆：cobas SARS-CoV-2 & Influenza A/B v2 在鼻咽拭子中的性能验证

【编辑推荐】本研究评估了cobas SARS-CoV-2 & Influenza A/B v2检测试剂（基于cobas 5800系统）与Allplex检测的对比性能，证实其对SARS-CoV-2、流感A/B的检测灵敏度（LoD低至11.0-25.3 copies/mL）和特异性（无29种非靶病原体交叉反应）表现优异，PPA达100%，NPA>98.3%，为呼吸道病毒共流行期的高通量自动化检测提供解决方案。

　　

ABSTRACT

cobas SARS-CoV-2 & Influenza A/B v2检测试剂作为新型高通量自动化分子检测方案，在Roche cobas 5800系统上展现出卓越性能。研究通过871例鼻咽拭子标本（含164例SARS-CoV-2阳性、76例流感A阳性、77例流感B阳性及554例阴性）的平行测试显示：与Allplex检测相比，其阳性符合率（PPA）达100%，阴性符合率（NPA）为98.3%-99.3%，Cohen’s kappa值0.95-0.96。检测限（LoD）显著优于同类产品（SARS-CoV-2 E/ORF1ab基因分别为25.3/12.4 copies/mL，流感A/B为16.1/11.0 copies/mL），且无29种呼吸道病原体交叉反应。

INTRODUCTION

呼吸道病毒混合感染诊断面临重大挑战。SARS-CoV-2与流感病毒症状重叠，而现有分子检测存在通量低、耗时长等问题。cobas v2检测通过双靶点设计（SARS-CoV-2靶向E/ORF1ab基因，流感A靶向M1/M2/PB2基因，流感B靶向NEP/NS1基因），配合cobas 5800/6800/8800系统实现全流程自动化，较v1版本灵敏度提升。

MATERIALS AND METHODS

研究纳入2016-2024年存档标本，采用PowerChek和BIOFIRE Respiratory 2.1plus Panel作为参照。通过probit回归计算LoD，使用AMPLIRUN标准品验证灵敏度（20次重复测试），29种病原体评估特异性。统计学分析包括PPA/NPA计算、Cohen’s kappa和Pearson相关性检验。

RESULTS

• 分析性能：流感B检测灵敏度最高（11.0 copies/mL），所有靶标在100 copies/mL浓度下均100%检出

• 临床一致性：12例SARS-CoV-2、7例流感A、6例流感B标本存在检测差异，高Ct值（34.1-36.9）提示低病毒载量

• 交叉验证：PowerChek复测显示6/7流感A、3/6流感B差异标本为真阳性，印证cobas超高灵敏度优势

DISCUSSION

该检测系统三大核心价值凸显：

1. 灵敏度突破：可识别Ct>35的低载量样本，较Allplex（LoD 248.9-1,649.6 copies/mL）提升10-100倍

2. 流程革新：单系统8小时处理1,344例标本，较BIOFIRE（45分钟/1例）、Xpert（30分钟/4例）大幅提升通量

3. 临床时效性：在2024年韩国冬春季SARS-CoV-2/流感共流行期间，平均报告时间缩短至4.2小时

局限性与展望：存档标本可能影响RNA稳定性，未来需多中心验证；虽未覆盖呼吸道合胞病毒（RSV），但新推出的cobas Respiratory flex检测已实现12种呼吸道病原体联检。

ACKNOWLEDGMENTS

研究获韩国 Roche Diagnostics 及保健产业振兴院（KHIDI）资助（RS-2024-00332244），印证产学研合作对提升公共卫生应急检测能力的关键作用。