猪源MARCH8通过K48连接的多聚泛素化降解MAVS负调控RLR信号通路

本研究针对猪先天免疫调控机制，揭示了MARCH8 E3泛素连接酶通过靶向线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)的K286位点进行K48连接的多聚泛素化修饰，进而负调控RLR信号通路的新机制。研究人员发现猪源MARCH8(porMARCH8)能显著抑制poly(I:C)刺激诱导的IFN-β表达，其RING-CH结构域对MAVS的泛素化降解至关重要，该发现为理解猪抗病毒免疫调控提供了新视角。

　　

在动物抗病毒免疫领域，RLR（RIG-I样受体）信号通路作为识别RNA病毒的关键途径，其精确调控机制一直是研究热点。线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)作为该通路的核心接头分子，其活性受到严格调控，但猪源E3泛素连接酶对该通路的调控机制尚不明确。Yangzhou University的研究团队在《Developmental 》发表的研究填补了这一空白。

研究采用基因克隆、双荧光素酶报告系统、免疫共沉淀(Co-IP)和体外泛素化实验等技术，从30日龄和210日龄大白猪组织中获取样本，系统解析了porMARCH8的生物学特性及其调控机制。

【Sequence analysis of porMARCH8】

成功克隆获得870bp的porMARCH8基因，编码289个氨基酸，与人类、小鼠和猴子的同源蛋白序列相似性达87.7%-88.9%。结构预测显示其含有典型的RING-CH结构域和两个跨膜(TM)结构域，在猪多种组织中广泛表达。

【Mechanistic insights】

实验证实porMARCH8通过RING-CH结构域与porcine MAVS直接相互作用，催化MAVS第286位赖氨酸(K286)发生K48连接的多聚泛素化修饰，进而通过泛素-蛋白酶体途径降解MAVS，显著抑制poly(I:C)刺激诱导的IFN-β mRNA表达。RING-CH结构域的缺失完全消除了其E3连接酶活性。

【Discussion】

该研究首次阐明porMARCH8通过"E3泛素连接酶-MAVS"调控轴负向调控猪RLR信号通路的分子机制。与已知的人MARCH1（靶向STING）、鱼MARCH7（靶向TBK1）等家族成员相比，porMARCH8展现出独特的底物选择性和作用位点，拓展了对MARCH家族蛋白功能多样性的认知。研究为开发基于泛素化调控的猪抗病毒免疫干预策略提供了理论依据，对理解哺乳动物先天免疫的物种特异性调控具有重要启示。

值得注意的是，porMARCH8对MAVS的特异性降解不依赖于病毒感染的刺激条件，提示其可能在维持免疫稳态中发挥基础性作用。未来研究可进一步探索该调控机制在猪重要病毒性疾病（如非洲猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征）中的潜在应用价值。