Kasumi-1外泌体通过PD-1/PD-L1通路介导TP53突变型急性白血病T细胞免疫逃逸的机制研究

本研究针对TP53突变急性白血病(AL)治疗预后差的临床难题，通过分析四种TP53 AL细胞系（MOLM-13、Kasumi-1、Molt-4、KG-1）外泌体(AL-exos)的免疫调控作用，发现Kasumi-1来源外泌体显著降低CD8+ T细胞比例并增加Tregs，其PD-1表达显著升高。miRNA测序揭示差异miRNAs通过网格蛋白介导的内吞作用传递肿瘤信号，激活TGF-β、Apelin等通路促进PD-L1富集。该研究为TP53突变AL的免疫治疗提供了新靶点。

　　

急性白血病（AL）作为造血系统的恶性克隆性疾病，其TP53突变亚型因治疗反应差、预后恶劣成为临床难题。尽管免疫检查点抑制剂（ICPs）展现出治疗潜力，但肿瘤细胞如何通过外泌体介导免疫逃逸的机制尚未阐明。这项发表于《Immunobiology》的研究，由昆明医科大学第一附属医院的研究团队开展，首次系统揭示了Kasumi-1细胞外泌体通过PD-1/PD-L1轴驱动T细胞免疫抑制的关键机制。

研究人员采用四种TP53状态不同的AL细胞系（野生型MOLM-13和突变型Kasumi-1/Molt-4/KG-1），通过外泌体提取鉴定、PBMC共培养、流式细胞术检测免疫细胞亚群、miRNA测序及生物信息学分析等技术，结合20例健康供体的PBMC样本，系统评估了AL-exos的免疫调控功能。

研究结果部分：

3.1 TP53突变AL细胞对PD-L1表达的影响

Western blot和RT-qPCR显示PD-L1表达呈MOLM-13>Kasumi-1>Molt-4>KG-1梯度，提示TP53突变可能上调PD-L1。

3.2 TP53突变AL细胞外泌体对淋巴细胞亚群的影响

流式检测发现Kasumi-1-exos使CD8⁺ T细胞降低42%（p<0.01），Tregs增加2.3倍（p<0.001），且PD-1表达显著高于其他组（p<0.01）。

3.3 外泌体标志物分析

透射电镜证实Kasumi-1-exos具有典型囊泡结构，Western blot检测到CD9/CD63/CD81/HSP70高表达，其中HSP70在Kasumi-1细胞与外泌体中表达量相当。

3.4 miRNA测序分析

鉴定出97个差异miRNA（59上调/38下调），hsa-miR-145-5p和hsa-miR-139-3p等与DNA损伤修复相关miRNA显著富集。

3.5 GO和KEGG分析

靶基因显著富集于网格蛋白依赖的内吞作用（p=3.2E-5）、TGF-β信号通路（p=0.002）和ECM-受体相互作用（p=0.004）等通路。

讨论部分指出，Kasumi-1-exos通过三种机制协同作用：① 携带hsa-miR-145-5p等miRNA经网格蛋白介导的内化作用传递肿瘤信号；② 激活BAT3复合体促进DNA损伤；③ 通过TGF-β和磷脂酰肌醇信号促使PD-L1富集，最终导致CD8⁺ T细胞耗竭和Treg扩增。该研究不仅揭示了TP53突变AL免疫逃逸的新机制，更为重要的是，发现Kasumi-1-exos特异的miRNA谱和HSP70高表达可能成为预后标志物，为开发靶向外泌体的免疫治疗策略提供了理论依据。未来需进一步验证AL-exos的剂量效应及时效关系，并探索其与临床TP53突变患者免疫治疗响应的相关性。