高效双检测HPLC方法在盐酸阿扑吗啡透皮给药系统研究中的应用与验证

为解决帕金森病治疗中盐酸阿扑吗啡(APO)传统给药方式的局限性，研究人员开发了一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)的双检测(紫外/荧光)分析方法，并应用于新型透皮压敏胶贴剂(PSA)的体外渗透和沉积研究。该方法符合ICH M10指南，使用新生猪皮肤模型和含抗坏血酸(AA)的稳定介质，实现了APO的精准定量。研究证实含PEG 400的贴剂可实现4.015±2.361 μg/cm2/hr的持续渗透，为开发临床可用的APO透皮给药系统(TDDS)奠定了基础。

　　

帕金森病患者常面临治疗困境——被誉为"左旋多巴等效替代药"的盐酸阿扑吗啡(APO)虽能有效控制"OFF"期症状，却因首过效应强、半衰期短(约33分钟)，被迫采用频繁皮下注射或口腔黏膜给药。这些方式不仅带来注射疼痛、皮下结节等副作用，对运动功能受限的患者更是操作困难。更令人遗憾的是，2023年上市的舌下膜剂因口咽副作用在欧美市场折戟。面对这些挑战，透皮给药系统(TDDS)因其无痛、可持续释药等优势，成为极具潜力的替代方案。

英国贝尔法斯特女王大学(Queen's University Belfast)药学院的研究团队在《Drug Delivery and Translational Research》发表重要成果。他们针对现有APO透皮研究中存在的皮肤模型生理相关性差、药物稳定性不足、分析方法欠规范等问题，建立了一套完整的解决方案。通过开发双检测HPLC方法、优化含抗坏血酸的稳定介质、采用新生猪皮肤模型，并结合多光子显微镜成像技术，系统评估了APO压敏胶贴剂的透皮性能。

关键技术包括：(1)建立符合ICH M10标准的RP-HPLC双检测(UV/FID)方法；(2)使用新生猪皮肤进行体外渗透实验；(3)采用Franz扩散池系统评估药物渗透动力学；(4)通过多光子显微镜表征贴剂中药物的三维分布；(5)优化含抗坏血酸的PBS(pH 7.4)作为稳定介质。

方法验证与稳定性研究

开发的反相HPLC方法在0.098-12.5 μg/mL(FID)和0.391-12.5 μg/mL(UV)范围内线性优异(R²>0.9999)，且证实0.1%(w/w)抗坏血酸能使APO在37°C下稳定48小时。饱和溶解度测试显示APO在优化介质中溶解度为4.08±0.20 mg/mL，满足漏槽条件。

贴剂表征与渗透性能

多光子显微镜显示APO均匀分布在聚丙烯酸酯压敏胶基质中(图8)。含PEG 400的贴剂表现最佳，24小时累积渗透量达107.020±63.322 μg/cm²，显著优于其他组(p<0.05)。渗透动力学符合Fickian扩散模型(R²>0.9)，稳态渗透速率为4.015±2.361 μg/cm²/hr。

皮肤沉积与提取优化

乙腈(ACN)被确定为最佳提取溶剂，对100 μg沉积量的提取效率达96.66±5.18%。沉积实验显示无PEG的贴剂仅有3.156±3.553 μg APO沉积在皮肤中，凸显渗透增强剂的关键作用。

该研究不仅提供了首个经全面验证的APO透皮研究分析方法，更揭示了聚丙烯酸酯压敏胶与APO的潜在相互作用——这可能是限制渗透效率的关键因素。尽管当前贴剂的渗透率尚未达到临床治疗需求，但建立的方法学框架为后续优化配方(如更换粘合剂类型、调整载药量)奠定了坚实基础。特别值得注意的是，研究采用的0.1%抗坏血酸稳定策略，解决了长期困扰APO研究的氧化降解难题，这一发现对开发其他含易氧化药物的TDDS具有普适性指导价值。