基于天然低共熔溶剂（NADES）超声辅助提取蜂胶中酚类化合物的绿色分析方法开发与优化

本研究针对传统蜂胶酚类化合物提取方法效率低、污染大的问题，开发了基于天然低共熔溶剂（NADES）的超声辅助提取（UAE）绿色方法。通过混合物设计和响应面法优化NADES（乳酸-葡萄糖-水摩尔比2:1:30）及提取条件（3.5 mL溶剂，21分钟超声），结合HPLC-DAD成功检测12种酚类化合物（检出限0.09-0.4 mg·L?1）。AGREE指标验证该方法符合绿色分析化学原则，为天然产物活性成分提取提供了环保新策略。

　　

蜂胶这种蜜蜂采集的树脂状物质，自古就被誉为"天然抗生素"，其核心价值在于富含具有抗氧化、抗炎等生物活性的酚类化合物。然而传统乙醇提取法不仅效率低下，大量有机溶剂的使用更与当前全球倡导的绿色化学理念背道而驰。如何在保证提取效率的同时实现环境友好，成为摆在研究者面前的重大挑战。

巴伊亚州研究基金会（FAPESB）支持的研究团队创新性地将天然低共熔溶剂（Natural Deep Eutectic Solvent, NADES）与超声辅助提取技术相结合，开发出全新的绿色分析方法。这项发表在《Journal of Chromatography B》的研究，通过精妙的实验设计破解了天然产物提取的环保难题。

研究采用三大关键技术：首先运用约束混合物设计优化NADES组分（乳酸-葡萄糖-水）；其次采用Doehlert矩阵响应面法确定最佳提取参数；最后建立HPLC-DAD同时检测12种酚类化合物的分析方法。样本来自三种不同来源的蜂胶，确保方法的普适性。

【优化NADES组分比例】

通过三组分约束混合物设计发现，当乳酸:葡萄糖:水摩尔比为2:1:30时，NADES对酚类化合物的提取效率最高。这种特殊配比形成的超分子结构能有效溶解蜂胶中的多酚物质。

【提取条件优化】

响应面法分析显示，3.5 mL NADES溶剂配合21分钟超声处理是最佳提取条件。与传统方法相比，该方案将溶剂用量减少40%，时间缩短60%，而提取效率提高35%。

【方法验证】

建立的HPLC-DAD方法可同时检测12种酚类标志物，包括咖啡酸、芦丁、香草酸等，检出限达0.09-0.4 mg·L^?1。加标回收率在92.3%-107.8%之间，RSD<5%，显示优异的重现性。

【绿色度评估】

AGREE和AGREEprep评估系统给予该方法0.82的高分（满分1分），在减少有害试剂、降低能耗、提高安全性等方面均显著优于传统方法，完全符合绿色分析化学12项原则。

这项研究的意义不仅在于开发出高效的蜂胶活性成分提取方法，更重要的是建立了天然产物研究的绿色范式。NADES技术突破性地解决了有机溶剂污染难题，而响应面法的应用则为复杂天然产物的提取优化提供了标准化方案。研究团队特别指出，该方法可直接推广到其他植物活性成分的提取，为天然药物研发和功能食品开发提供了可持续发展的技术支撑。未来，这种绿色提取技术有望重塑整个天然产物产业链，在保障人类健康的同时守护生态环境。