COVID-19疫苗加强针接种对泰国医护人员B/T淋巴细胞亚群动态变化的长期影响研究

本研究针对COVID-19疫苗加强接种后特异性免疫记忆维持的关键科学问题，由泰国公共卫生部-美国CDC合作团队开展为期两年的前瞻性队列研究。通过ELISpot和流式细胞术等技术，系统评估了CoronaVac和Oxford-AstraZeneca疫苗不同接种方案对医护人员S1/RBD特异性B细胞及IFN-γ/TNF-α+ T细胞的动态影响，发现首剂加强针可显著提升B细胞反应（4.2-9.0倍），而T细胞应答维持稳定。该研究为优化疫苗接种策略提供了重要免疫学依据。

　　

随着全球COVID-19大流行的持续，疫苗诱导的免疫保护持久性成为关键科学问题。尽管前期研究表明基础免疫接种能有效诱导抗体和T细胞反应，但关于多次加强接种后特异性淋巴细胞亚群的动态变化规律仍缺乏系统研究。特别是在采用异源接种策略的泰国等发展中国家，医护人员作为高风险人群，其接种不同技术路线疫苗后的免疫记忆特征亟待阐明。

泰国公共卫生部-美国疾病预防控制中心合作项目组开展了一项为期两年的前瞻性队列研究，通过对128名医护人员定期采集外周血样本，采用B细胞酶联免疫斑点（ELISpot）和细胞内细胞因子染色等关键技术，系统分析了CoronaVac和Oxford-AstraZeneca疫苗不同接种方案诱导的SARS-CoV-2特异性B/T淋巴细胞应答动态。研究将参与者分为三组：A组（CoronaVac初免+Oxford-AstraZeneca首剂加强）、B组（CoronaVac初免+Pfizer-BioNTech首剂加强）和C组（Oxford-AstraZeneca初免），所有组别后续均接受最多4剂次加强接种。论文发表在《Scientific Reports》杂志。

研究主要采用三项关键技术：1）B细胞ELISpot检测S1/RBD特异性抗体分泌细胞；2）流式细胞术分析IFN-γ/TNF-α⁺ CD4⁺/CD8⁺ T细胞；3）实时RT-PCR排除自然感染干扰。所有检测均在泰国玛希隆大学医学技术学院完成，采用统一标准操作流程确保数据可比性。

S1-和RBD特异性B淋巴细胞应答

研究发现基础免疫后，Oxford-AstraZeneca组（C组）的S1特异性B细胞增加幅度（3.4倍）显著高于CoronaVac组（A/B组<2.0倍）。首剂加强接种后，三组均出现显著提升：A组S1/RBD特异性B细胞分别增加4.7/5.6倍，B组增加5.6/9.0倍，C组增加4.2/6.7倍（p<0.01）。值得注意的是，后续加强接种仅能维持而未能进一步提升B细胞水平，表明免疫系统存在"平台效应"。

IFN-γ和/或TNF-α产生性CD4及CD8T淋巴细胞应答

与B细胞不同，T细胞应答呈现稳定特征。基础免疫后，各组CD4⁺/CD8⁺ T细胞产生IFN-γ/TNF-α的比例波动在0.5-1.3倍范围。加强接种后，虽然统计学上无显著提升，但观察到稳定的记忆维持现象：在13-24周应答下降后，后续加强接种可使其恢复至首剂加强后的水平。特别是A组CD8⁺ T细胞在13-24周时反而高于1-12周水平，提示病毒载体疫苗可能具有独特的T细胞激活模式。

讨论与意义

该研究首次系统描绘了东南亚人群多次COVID-19加强接种后的淋巴细胞动态图谱，揭示三个关键发现：1）首剂加强接种是获得最大B细胞应答的关键窗口；2）T细胞应答呈现"高原式"稳定特征；3）后续加强主要发挥"恢复"而非"增强"作用。这些发现为疫苗策略优化提供了重要启示：在资源有限地区，可优先确保首剂加强接种；而多次加强的重点应放在维持而非进一步提升免疫水平。

研究创新性体现在三方面：1）采用多时间点动态监测克服横断面研究的局限；2）同步评估B/T细胞双重应答；3）聚焦实际接种中的混合方案。局限性包括样本量受疫情波动影响，以及未能区分循环抗体与组织驻留记忆细胞。未来研究可结合单细胞测序等技术，深入解析异源接种诱导的免疫记忆质量差异。