CD4 T细胞中ProS1-MerTK信号通路的调控机制及其在肿瘤浸润淋巴细胞扩增与功能优化中的临床潜力

本研究揭示了ProS1-MerTK信号通路在CD4 T细胞中的关键作用，通过增强中央记忆表型形成、代谢适应性和增殖能力，显著提升肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）在过继性细胞治疗（ACT）中的抗肿瘤效能。研究采用CRISPR-Cas9敲除和功能实验证实，该通路通过调控Th1/Th17极化平衡和降低Treg比例，为优化黑色素瘤免疫治疗方案提供了新靶点。

　　

背景

TAM受体家族（Tyro3/Axl/MerTK）是免疫调控的核心分子，其配体ProS1通过结合凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸（PtdSer）介导免疫耐受。近年研究发现，MerTK在CD8 T细胞中具有共刺激作用，但其在CD4 T细胞中的功能尚不明确。本研究聚焦ProS1-MerTK信号如何调控CD4 T细胞在肿瘤免疫治疗中的关键特性。

方法

团队从健康供体分离na?ve CD4 T细胞，通过CD3/CD28抗体激活，结合CRISPR-Cas9敲除、流式细胞术（检测CCR7/CD45RO记忆亚群）和Seahorse能量代谢分析等技术，系统评估了ProS1处理对T细胞功能的影响。临床样本方面，从III/IV期黑色素瘤患者活检组织中扩增TIL，分析ProS1对TIL表型的调控。

结果

1. 激活诱导ProS1-MerTK信号上调

CD4 T细胞激活后第3天，30%细胞表达MerTK，60%结合ProS1，伴随配体消耗（ELISA验证）。Western blot显示MerTK蛋白水平显著升高，且表达持续至第5天峰值。

2. 促进中央记忆表型与代谢适应

ProS1处理使中央记忆（CM）细胞比例提升20%（从40%增至48%），效应记忆（EM）细胞减少。MerTK⁺细胞线粒体备用呼吸容量（SRC）和最大耗氧率（OCR）显著高于MerTK^-细胞，CRISPR敲除后代谢能力下降。

3. 增强增殖与效应功能

ProS1使CD4 T细胞第5代增殖比例提高50%（13%→20%），MerTK⁺细胞分泌更多IFN-γ和TNF-α。敲除MerTK后，细胞绝对数量和细胞因子分泌均降低。

4. 偏向Th1但诱导Th17极化

Th1极化细胞MerTK表达量是Th2的7倍（67% vs 9%），但ProS1处理 paradoxically降低Tbet表达。在TIL扩增中，ProS1显著提升RORγT⁺ Th17细胞比例（伴随STAT3磷酸化增强），同时减少CD25⁺FoxP3⁺ Tregs。

5. 改善TIL治疗潜力

ProS1处理的TIL显示更高TCF1/Tox比值（干细胞性标志），且快速扩增阶段IL-17A分泌增加2倍。临床样本中，初始扩增阶段CM细胞比例提升，CD8:CD4比率更优。

讨论

该研究首次阐明ProS1-MerTK信号通过"代谢-记忆表型-效应功能"轴协同增强CD4 T细胞抗肿瘤能力。特别值得注意的是，ProS1在TIL扩增中诱导的Th17偏倚与传统Th1优势策略形成互补，其降低Treg的特性可能克服肿瘤微环境免疫抑制。尽管MerTK在DC中的抑制作用提示通路复杂性，但本研究为优化ACT提供了可转化方案——通过外源ProS1补充获得高持久性、低耗竭的TIL产品。未来需进一步探索该通路在实体瘤微环境中的动态调控机制。