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内生真菌Acremonium sclerotigenum通过转录组调控黄瓜白粉病抗性机制及促生作用研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月17日 来源:Microbiological Research 6.1
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本研究针对黄瓜白粉病病原Podosphaera xanthii的化学防治困境,通过体外抑菌实验、温室试验结合UHPLC-MS/MS代谢组学和转录组分析,揭示内生真菌A. sclerotigenum通过分泌oleanolic acid等抗菌代谢物及上调ERF1、PR-4等防御基因实现70%病害抑制率,同时提升25%叶片数和30%株高,为绿色农业提供新型生防策略。
在黄瓜种植业面临严峻挑战的当下,由Podosphaera xanthii引起的白粉病如同悬在菜农头上的达摩克利斯之剑。这种通过空气传播的病原真菌能在叶片表面形成白色粉状霉层,导致光合作用受阻、果实畸形,每年造成高达30%的产量损失。更棘手的是,传统化学杀菌剂长期使用已引发病原菌抗药性,而消费者对有机蔬菜的需求却与日俱增。这种"既要产量又要安全"的两难局面,促使科学家将目光投向自然界中与植物共生的微生物——它们或许掌握着破解困境的生物学密码。
吉林农业大学植物保护学院的研究团队独辟蹊径,选择了一种名为Acremonium sclerotigenum的内生真菌作为研究对象。这种真菌能像"植物疫苗"一样在黄瓜体内定殖,既能直接攻击病原菌,又能激活植物的免疫系统。通过为期两年的系统研究,他们发现A. sclerotigenum的发酵滤液可使P. xanthii孢子萌发率骤降至13.87%,温室试验中病害发生率降低70%,同时显著促进植株生长。相关成果发表在《Microbiological Research》上,为作物病害绿色防控提供了全新解决方案。
研究采用多组学联用技术:通过超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)鉴定出oleanolic acid等4类关键抗菌物质;利用Illumina测序平台开展转录组分析,发现ERF1(乙烯响应因子)、PR-4(病程相关蛋白)等防御基因显著上调;结合RT-qPCR验证了RBOHA(呼吸爆发氧化酶)在诱导系统抗性中的核心作用。所有实验均在Jilin Agricultural University的植物病理学实验室完成,采用完全随机区组设计确保数据可靠性。
【抑制P. xanthii分生孢子萌发】
体外实验显示,10%浓度A. sclerotigenum滤液处理6小时后,病原菌孢子出现明显畸形:平均长度缩短23.5%,宽度增加18.2%。透射电镜观察到孢子壁出现穿孔现象,证实代谢产物能破坏病原菌细胞结构完整性。
【次级代谢产物鉴定】
UHPLC-MS/MS从滤液中鉴定出37种活性物质,其中肽类抗生素virginiamycin对P. xanthii的EC50(半数有效浓度)仅为2.3μg/mL,比对照药剂嘧菌酯低6.8倍。值得注意的是,植物生长素前体物质sphinganine的发现解释了促生现象。
【防御相关基因表达谱】
RNA-seq分析发现,处理组叶片中苯丙烷代谢通路关键酶PAL(苯丙氨酸解氨酶)表达量提升4.2倍,与木质素沉积增强的病理学观察结果吻合。水杨酸信号通路中的NPR1(非表达子蛋白1)持续高表达,暗示系统获得抗性(SAR)的激活。
【温室防效与促生评估】
在人工接种条件下,A. sclerotigenum处理组的病情指数仅为对照组的30%,且新生叶片叶绿素SPAD值提高20%。令人惊喜的是,处理组黄瓜提前3天进入开花期,单株坐果数增加35%,显示其"防病促生双效合一"的独特优势。
这项研究首次系统阐释了A. sclerotigenum通过"代谢武器库"(抗菌物质)和"植物免疫开关"(防御基因)双重机制防控黄瓜白粉病。其中发现的virginiamycin等新型抗菌肽为农药创制提供了先导化合物,而ERF1-MYB10转录调控网络的解析则为分子育种指明新靶点。更深远的意义在于,该菌株能减少化学农药使用量同时提升产量,完美契合联合国可持续发展目标(SDGs)中"零饥饿"和"负责任消费"的双重要求。未来研究可进一步优化其发酵工艺和田间施用技术,推动从实验室到产业的转化。正如通讯作者Shu-Yan Liu教授在讨论部分强调的:"这种‘以菌治菌’的策略,或许能开创植物病害防控的新纪元。"
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