新型μ-阿片受体拮抗剂AT-99的合成与药理特性研究：阻断吗啡诱导的多巴胺释放及行为抑制效应

为解决阿片类药物滥用危机中高效低毒拮抗剂的开发难题，意大利研究团队通过计算机辅助设计合成新型μ-阿片受体(MOR)拮抗剂AT-99。体外实验证实其可剂量依赖性抑制DAMGO诱导的[35S]GTPγS结合，体内实验显示1-3 mg/kg剂量能有效阻断吗啡诱导的伏隔核多巴胺释放及行为抑制。该研究为开发新一代阿片拮抗剂提供了重要分子骨架。

　　

全球阿片类药物滥用危机已演变为严峻的公共卫生挑战。在美国，芬太尼等强效激动剂的泛滥导致每年超过20万人死于药物过量；欧盟地区虽然疫情相对缓和，但2021-2022年间仍有74%的药物过量死亡与海洛因等阿片类药物相关。现有治疗手段如美沙酮、纳洛酮(NAL)和纳曲酮虽有一定效果，但存在选择性差、作用时间短或成瘾性等问题。特别是纳洛酮对μ-阿片受体(MOR)、δ-阿片受体(DOR)和κ-阿片受体(KOR)的非选择性拮抗作用，常导致严重副作用。开发新型高效低毒的MOR特异性拮抗剂成为当前药物研发的重要方向。

意大利卡利亚里大学(University of Cagliari)的研究团队基于前期计算机模拟发现，胺基与酚羟基呈顺式-平伏键构型的化合物能显著增强与MOR结合口袋的相互作用。据此设计合成了3-(1,3-二甲基-顺式-5-(甲基(苯乙基)氨基)环己基)苯酚，并系统评估了其药理特性。相关成果发表在《Pharmacology Biochemistry and Behavior》期刊。

研究采用[³H]DAMGO竞争结合实验和[³⁵S]GTPγS结合测定等体外方法评估AT-99对MOR的亲和力及功能活性；通过脑微透析技术监测SD大鼠伏隔核(NAc)多巴胺(DA)水平变化，结合行为评分量表(BRS)分析体内拮抗效果。

Effect of AT-99 on agonist-induced stimulation of [³⁵S]GTPγS binding

在10 μM浓度下，AT-99本身不激活G蛋白信号通路，但能剂量依赖性抑制DAMGO诱导的[³⁵S]GTPγS结合（最高抑制率达60%）。与纳洛酮相比，AT-99对DAMGO效价的降低作用较弱，仅在最高测试浓度(100 μM)时才显现类似效果。

Discussion

放射性配体结合实验显示AT-99能完全置换[³H]DAMGO，但亲和力低于纳洛酮。体内实验中，1-3 mg/kg静脉注射可剂量依赖性地阻断吗啡诱导的NAc壳区DA升高（抑制率35-72%），高剂量还能逆转吗啡导致的行为抑制。值得注意的是，AT-99表现出中性拮抗特性——既不激活G蛋白信号，又能有效阻断激动剂效应。

该研究证实AT-99虽与MOR结合较弱，但具备独特的药理特性：①保留纳曲酮核心结构但降低副作用风险；②特异性阻断MOR介导的DA释放而不影响基础水平；③可逆性抑制吗啡的行为效应。这些发现为开发新一代阿片拮抗剂提供了重要分子模板，其结构优化可能产生更高效的候选药物。研究同时提示，相对较弱的受体结合特性或许能转化为更好的安全性特征，这为阿片类药物过量的急救用药开发提供了新思路。