长期暴露于苯并[b]荧蒽（BbF）未诱导Mutamouse雄性生殖细胞突变：对遗传毒性评估的启示

本研究针对环境污染物苯并[b]荧蒽（BbF）的潜在遗传毒性风险，通过90天和180天暴露实验，结合转基因小鼠lacZ报告基因检测与双链纠错测序技术（DS），首次系统评估了BbF对雄性生殖细胞的致突变效应。结果表明，尽管BbF在体细胞中具有强致突变性，但生殖细胞通过代谢隔离或高效DNA修复机制避免了突变累积，为环境毒理学风险评估提供了重要依据。

　　

研究背景与意义

多环芳烃（PAHs）作为广泛存在的环境污染物，其代表性物质苯并[b]荧蒽（BbF）被国际癌症研究机构（IARC）列为2B类可能人类致癌物。既往研究表明，BbF可通过细胞色素P450（CYP450）代谢活化，在体细胞中诱导显著的DNA加合物和C:G>A:T颠换突变。然而，关于BbF是否影响生殖细胞——这一关乎代际遗传的关键靶点——始终缺乏直接证据。鉴于生殖细胞突变可能引发遗传性疾病和癌症易感性，加拿大卫生部（Health Canada）的研究团队通过创新性实验设计，在《Reproductive Toxicology》发表的研究填补了这一空白。

关键技术方法

研究采用携带lacZ报告基因的MutaMouse模型，设置6个剂量组（0-50 mg/kg BW/day）进行90天和180天暴露实验。通过转基因 rodent（TGR）突变检测与双链测序（Duplex Sequencing, DS）技术联用，前者检测lacZ基因突变频率（MF），后者以<10^-7错误率精准解析全基因组突变谱。实验同步监测体重变化以评估系统毒性，并重点分析BbF特征性C:G>A:T突变。

研究结果

1. 剂量与暴露时长效应：高剂量组（50 mg/kg）在180天时出现33%体重下降，但90天暴露未见显著毒性。

2. 突变频率分析：lacZ检测显示所有剂量组MF与对照组无统计学差异（p>0.05），DS验证MF_min与MF_max均未升高。

3. 突变谱特征：体细胞中占主导的C:G>A:T颠换在生殖细胞未显著富集，提示BbF活性代谢物可能未穿透血睾屏障。

结论与讨论

该研究首次证实BbF在长期暴露下不诱导雄性生殖细胞突变，这一发现与体细胞结果形成鲜明对比。研究者提出两种机制假说：①BbF及其代谢物在睾丸中分布受限；②生殖细胞特有的DNA损伤应答（如错配修复和核苷酸切除修复）高效清除加合物。尽管DS技术灵敏度可达10^-7，但仍可能遗漏极低频突变，未来需结合单细胞测序进一步验证。从风险评估视角，这一结果提示现行PAHs监管框架需区分体细胞与生殖细胞毒性数据，为GHS分类提供新证据。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献支持内容；专业术语如CYP450、DS等均按原文格式保留大小写及标点；机构名称"Health Canada"按国际惯例保留英文。）