靶向肝星状细胞PD-L1调控CCl4肝损伤模型中的炎症与纤维化机制研究

本研究针对肝纤维化治疗中肝星状细胞(HSC)PD-L1的免疫调控作用，通过构建HSC特异性PD-L1敲除(PD-L1HSCKO)小鼠模型，结合多组学分析揭示：靶向PD-L1可显著降低CCl4诱导的胶原沉积和肌成纤维细胞活化，同时改变肝脏免疫微环境中淋巴细胞与髓系细胞的平衡，为肝纤维化治疗提供新策略。

　　

肝脏作为人体重要的代谢器官，其纤维化进程一直是医学界的重大挑战。当肝脏反复受损时，原本静息的肝星状细胞(HSC)会像"沉睡的巨人"般觉醒，转化为活化的肌成纤维细胞，疯狂分泌胶原蛋白形成瘢痕组织。更棘手的是，这些细胞还通过程序性死亡配体1(PD-L1)与免疫细胞"暗通款曲"，形成抑制性免疫微环境。这种双重作用使得肝纤维化治疗陷入"既需抑制胶原沉积，又要调节免疫失衡"的两难境地。

为破解这一难题，研究人员构建了HSC特异性PD-L1敲除小鼠(PD-L1^HSCKO)，采用CCl₄诱导的肝损伤模型，通过组织染色、免疫荧光、Western blot等技术评估纤维化程度，结合多重免疫荧光和细胞因子谱分析炎症特征，并运用空间转录组和靶向蛋白质组学揭示分子机制。研究结果发表在《Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology》。

【背景与目的】部分

PD-L1在HSC上的表达被发现与HSC活化和免疫抑制密切相关。研究人员假设靶向这一通路可能成为调控肝纤维化的"双刃剑"——既能直接抑制HSC活化，又可解除其对淋巴细胞的抑制。

【方法】部分

通过交叉Cd274 floxed小鼠与Collagen1A1-Cre小鼠获得PD-L1^HSCKO模型。采用6周CCl₄注射建立肝损伤，运用天狼星红染色评估胶原，免疫荧光标记F4/80⁺、CD11b⁺等免疫细胞，并通过转录组和蛋白质组解析分子网络。

【结果】部分

1. 纤维化表型：PD-L1^HSCKO小鼠肝脏胶原沉积减少40%，α-SMA⁺肌成纤维细胞密度显著降低

2. 免疫重塑：GranzymeB⁺细胞毒性T细胞和CD20⁺B细胞浸润增加2.3倍，而F4/80⁺库普弗细胞减少57%

3. 分子机制：HSC分泌谱分析显示GM-CSF、GDF-15等13种细胞因子表达改变，CCL/CXC趋化因子网络重构

4. 功能保护：尽管AST/ALT水平相当，但PD-L1缺失显著改善肝脏组织结构

【结论】部分

该研究首次阐明HSC PD-L1通过"双信号"调控机制：一方面通过CCL5-CXCR3轴促进HSC-髓系细胞互作，另一方面经由GDF-15介导胶原生成。靶向干预该通路可使纤维化肝脏"改邪归正"——既减轻瘢痕形成，又重塑免疫微环境。这种"一石二鸟"的治疗策略为临床转化提供新思路，特别是针对免疫检查点抑制剂相关肝毒性的防治具有独特价值。