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基于双酶级联催化从蔗糖定向合成高α-1,6键占比的缓释型α-葡聚糖及其血糖调控机制研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月18日 来源:International Journal of Biological Macromolecules 7.7
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为解决传统淀粉基碳水化合物消化过快导致的餐后血糖波动问题,韩国研究人员创新性地采用来自Neisseria polysaccharea的淀粉蔗糖酶(NpAS)与Streptococcus thermophilus的4,6-α葡聚糖转移酶(St4,6-αGT)构建双酶体系,以蔗糖为底物通过"自下而上"法合成α-1,6键占比达23.5%的定制化α-葡聚糖。该产物在体外α-葡萄糖苷酶水解实验中显示缓释特性,小鼠实验证实其能显著(p<0.05)降低血糖峰值,为开发功能性控糖食品原料提供了新策略。
在现代饮食结构中,精制碳水化合物引发的餐后血糖飙升已成为肥胖和2型糖尿病的重要诱因。传统淀粉分子中α-1,4键占主导,易被α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶快速水解,而α-1,6键因异麦芽糖酶水解效率较低具有缓释特性。当前通过糖原分支酶(GBE)等"自上而下"改性淀粉的方法存在能耗高(需糊化处理)、α-1,6键引入率有限(<10%)等瓶颈。
韩国基础科学研究院(Korea Basic Science Institute)的Byung-Hoo Lee团队在《International Journal of Biological Macromolecules》发表研究,开创性地采用淀粉蔗糖酶(Amylosucrase, AS)与4,6-α葡聚糖转移酶(4,6-α-glucanotransferase, 4,6-αGT)双酶系统,以无需糊化的蔗糖为底物,通过"自下而上"合成策略制备出α-1,6键占比高达23.5%的定制化α-葡聚糖。关键技术包括:①优化NpAS与St4,6-αGT酶浓度比实现分子量(2.6×103-1.2×104 Da)精确控制;②通过部分甲基化醛醇乙酸酯(PMAA)分析和高效阴离子交换色谱(HPAEC)表征键型比例;③采用大鼠肠丙酮粉(RIAP)提取α-葡萄糖苷酶进行体外消化模拟;④建立小鼠模型评估餐后血糖曲线。
【Production of α-glucans】
酶反应体系在0.1 U/mL St4,6-αGT时获得最高产率(29.0%),但随酶浓度提升至10 U/mL,因过度分支导致溶解度下降(产率12.6%)。核磁共振分析显示α-1,6键比例与St4,6-αGT浓度呈正相关(14.2-23.5%),同时α-极限糊精(α-LDx)占比提升至69.2%。
【In vitro digestibility】
体外消化实验表明,含23.5% α-1,6键的产物在人胰腺α-淀粉酶(HPA)和肠α-葡萄糖苷酶作用下,水解速率较对照组降低42%,证实其缓释特性源于异麦芽糖酶对α-1,6键的低效水解。
【In vivo glycemic response】
小鼠实验中,改性α-葡聚糖组血糖峰值较葡萄糖对照组显著降低(p<0.05),且血糖曲线下面积(AUC)减少31%,证明其能有效延缓葡萄糖吸收。
该研究突破性地将Reuteran型α-葡聚糖合成路径工业化瓶颈,相比传统淀粉改性工艺节能35%(省去糊化步骤)。所获产物兼具缓慢消化特性与高水溶性,既能通过回肠刹车机制调控饱腹感,又可作为益生元促进肠道菌群平衡。这种"一石三鸟"(控血糖、延饱腹、调菌群)的特性使其在功能性食品和特医食品领域具有广阔应用前景,为代谢综合征防控提供了全新的碳水化合物解决方案。
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