清热活血方通过调控TREM2/PI3K/AKT/STAT6通路重塑肿瘤免疫微环境增强抗PD-1治疗非小细胞肺癌的机制研究

本研究针对非小细胞肺癌(NSCLC)免疫治疗耐药难题，揭示了传统中药清热活血方(QRHXF)通过靶向TREM2信号通路重塑肿瘤免疫微环境(TME)的机制。山东中医药大学附属医院呼吸与危重症医学科徐飞团队发现，QRHXF能显著抑制M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化，增强CD8+T细胞活性，并与抗PD-1治疗产生协同抗肿瘤效应。该研究为开发新型免疫治疗辅助药物提供了理论依据，论文发表于《BMC Complementary Medicine and Therapies》。

　　

在肿瘤免疫治疗领域，非小细胞肺癌(NSCLC)患者对PD-1/PD-L1抑制剂等免疫检查点阻断(ICB)疗法的响应率始终徘徊在20%-30%。这种治疗瓶颈主要源于肿瘤微环境(TME)中免疫抑制性细胞群的浸润，特别是具有促肿瘤特性的M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)。这些细胞通过分泌IL-10、TGF-β等免疫抑制因子，构建有利于肿瘤逃逸的"冷肿瘤"微环境。更棘手的是，现有ICB疗法常伴随免疫相关不良反应，亟需寻找能协同增强疗效且安全性良好的辅助治疗策略。

山东中医药大学附属医院呼吸与危重症医学科的研究团队将目光投向了传统中药清热活血方(QRHXF)。这个由黄芩和赤芍组成的经典复方，既往研究已显示其具有调节炎症和免疫微环境的潜力。团队通过构建Lewis肺癌(LLC)小鼠模型，采用多组学技术揭示了QRHXF与抗PD-1抗体的协同作用机制。研究发现，QRHXF能特异性靶向髓系细胞触发受体2(TREM2)，通过抑制PI3K/AKT/STAT6信号通路，重塑免疫微环境中M1/M2巨噬细胞平衡，最终增强T细胞抗肿瘤免疫应答。这项创新性工作为破解ICB耐药难题提供了新思路。

研究主要采用以下关键技术：建立LLC皮下移植瘤模型进行体内药效学评价；流式细胞术分析肿瘤浸润免疫细胞亚群；免疫荧光和Western blot验证TREM2及下游通路蛋白表达；ELISA和q-PCR检测炎症因子变化；免疫组化评估肿瘤血管生成和转移标志物。

Antitumor effects of combination treatment

通过动物实验证实，QRHXF高剂量组(15.16 g/kg)使肿瘤重量减少52.69%，与抗PD-1联用后抑制率提升至87.09%。HE染色显示联合治疗组肿瘤细胞密度显著降低，坏死区域增加。值得注意的是，QRHXF有效缓解了单用抗PD-1导致的体重下降，证实其减毒作用。

QRHXF modulated inflammatory response

q-PCR和ELISA数据显示，QRHXF显著上调IFN-γ(2.5倍)和TNF-α(1.8倍)，同时下调TGF-β1(0.4倍)、IL-6(0.6倍)和IL-1β(0.5倍)，这种促炎微环境的重编程在联合组最为明显。

QRHXF repressed the infiltration of M2-TAMs

流式分析显示QRHXF使M2-TAMs(F4/80⁺CD206⁺)比例从32.4%降至18.7%，Western blot证实Arg-1表达下调而iNOS上调。免疫荧光显示QRHXF特异性减少TREM2⁺CD206⁺双阳性巨噬细胞浸润。

QRHXF alleviated T cell exhaustion

联合治疗使肿瘤浸润CD8⁺T细胞比例增加2.1倍，IFN-γ⁺CD8⁺T细胞提升1.7倍，同时显著降低PD-1、LAG-3等耗竭标志物表达。

Mechanistic insights

Western blot揭示QRHXF抑制TREM2表达(0.3倍)及PI3K(Tyr317)、AKT(Ser473)、STAT6(Y641)磷酸化，证实其通过该通路调控巨噬细胞极化。

这项研究首次阐明QRHXF通过"TREM2-PI3K/AKT-STAT6"轴重塑免疫微环境的作用机制。其科学价值体现在三方面：为中药增强免疫治疗提供直接证据；发现TREM2作为中药作用的新靶点；提出调节巨噬细胞极化克服ICB耐药的联合治疗策略。临床应用前景广阔，QRHXF既可增强PD-1抑制剂疗效，又能减轻其毒副作用，符合"减毒增效"的中西医结合治疗理念。未来研究可进一步解析QRHXF活性成分的协同作用机制，并探索TREM2表达水平作为疗效预测标志物的可能性。