印度主要养殖鱼类Labeo rohita自然共感染的首次报道及其肾脏蛋白质组学特征解析

语：本研究首次报道了印度主要经济鱼类Labeo rohita在养殖场中由Aeromonas veronii等病原体引发的自然共感染现象，通过分子鉴定、组织病理学和label-free蛋白质组学技术，揭示了共感染导致的肾脏氧化应激（ROS）通路异常及宿主免疫应答特征，为水产抗病育种提供了新型分子靶点。

　　

在水产养殖业这个关乎全球粮食安全的重要领域，印度主要鲤鱼品种Labeo rohita正面临前所未有的健康危机。随着集约化养殖的发展，细菌性疾病的爆发已成为制约产业发展的瓶颈。令人担忧的是，养殖场中普遍存在的多种病原体共感染现象尚未被充分认知，传统的单一病原体防控策略往往收效甚微。更棘手的是，气候变化导致的水温波动进一步削弱了鱼类的免疫防御能力，使得Aeromonas和Pseudomonas等条件致病菌有机可乘。这些"隐形杀手"不仅造成大规模死亡，更通过复杂的宿主-病原体相互作用引发器官功能损伤，最终导致严重的经济损失。

针对这一严峻挑战，印度农业研究委员会渔业教育中心（ICAR-Central Institute of Fisheries Education）的研究团队开展了一项开创性研究。他们首次系统揭示了印度Maharashtra地区养殖场中Labeo rohita自然共感染的病原谱系和分子机制，相关成果发表在《Microbial Pathogenesis》上。研究人员采用多组学联用策略，通过16S rRNA基因测序确定优势菌种，结合组织病理学观察器官损伤特征，并运用label-free定量蛋白质组学技术解析宿主肾脏的应激反应网络。特别值得注意的是，该研究建立了共感染条件下宿主蛋白质表达谱与临床表现的对应关系，为开发新型防控策略提供了理论依据。

关键技术方法包括：从印度Maharashtra两个养殖场采集自然感染病鱼；通过VITEK 2系统进行细菌鉴定；采用Kirby-Bauer法测试9种抗生素敏感性；进行肾脏组织的非标记定量蛋白质组学分析；运用透射电镜观察超微结构变化；采用qPCR验证关键蛋白表达。

【结果】

病例特征：2022-2023冬季养殖季中，患病鱼表现典型临床症状包括皮肤溃疡、鳞片脱落和尾鳍腐烂。Dahanu养殖场的病鱼还出现眼球浑浊症状，而Pen养殖场病例以体表出血为主要特征。

病原鉴定：分子分析显示Aeromonas veronii是优势菌种（占分离株的43%），其次为A. hydrophila（21%）、A. dhakensis（14%）和Pseudomonas mosselii（11%）。值得注意的是，所有菌株对氨苄青霉素、甲氧西林和青霉素均表现完全耐药。

组织病理学：共感染导致多器官损伤，鳃组织出现上皮细胞坏死和淋巴细胞浸润，肝脏呈现空泡变性和胆管增生，肾脏则表现出肾小管坏死和间质纤维化等特征性病变。

蛋白质组学：肾脏组织鉴定到327个差异表达蛋白，其中过氧化物酶（peroxiredoxin）等抗氧化蛋白显著上调。通路分析揭示氧化磷酸化和NOD样受体信号通路被显著激活，表明共感染引发了强烈的氧化应激反应。

【讨论与结论】

这项研究首次证实了自然条件下Aeromonas与Pseudomonas共感染可导致Labeo rohita多器官功能障碍。特别重要的是，蛋白质组学数据揭示了肾脏作为应激反应枢纽的关键作用——通过调控谷胱甘肽代谢（glutathione metabolism）和热休克蛋白（HSP70）表达来应对病原侵袭。研究发现的多重耐药现象警示当前抗生素使用策略亟待调整，而鉴定到的差异表达蛋白如超氧化物歧化酶（SOD）等，为开发抗病饲料添加剂提供了潜在靶点。

从更广阔的视角看，该研究建立的共感染研究模型为理解气候变化条件下水产动物健康管理提供了新范式。作者Pradeep A等强调，未来应重点关注宿主-微生物互作界面的动态变化，这将有助于发展基于生态调控的综合防控体系。正如研究所示，通过监测肾脏应激蛋白表达谱，可建立早期预警系统，这对实现水产养殖的可持续发展具有重要实践价值。