综述：疟疾发病机制与治疗中的细胞外囊泡：新见解与未来展望

这篇综述系统阐述了细胞外囊泡（EVs）尤其是外泌体（EXOs）在疟原虫免疫逃逸、宿主-寄生虫互作中的关键作用，揭示了其作为新型生物标志物和药物载体的潜力。作者深入探讨了EXOs的分子机制（如miRNA/lncRNA递送）、三维培养模型的应用，并提出了靶向EVs的疟疾治疗新策略（如纳米疫苗开发），为攻克耐药疟疾提供了创新思路。

　　

细胞外囊泡的生物发生与功能

细胞外囊泡（EVs）是由双层磷脂膜包裹的纳米级颗粒，根据起源可分为外泌体（EXOs）、微泡（MVs）和凋亡小体。其中，直径30-120 nm的EXOs通过内体途径生成，携带蛋白质、脂质和核酸（如miR-21、lncRNA MALAT1）等活性分子。研究发现，疟原虫感染的红细胞（iRBCs）能分泌富含侵袭相关蛋白的Pf-EXOs，通过"群体感应"机制调控寄生虫密度。

外泌体在疟疾发病机制中的作用

疟原虫生命周期中，EXOs成为宿主与寄生虫的"分子特洛伊木马"。Pf-EXOs通过递送疟原虫RNA结合蛋白（PfPUF1）劫持宿主细胞翻译机器，而宿主免疫细胞分泌的EXOs（如肥大细胞来源的MCs-Exo）可加剧实验性脑疟（CM）发展。值得注意的是，EXOs能穿越血脑屏障（BBB），其携带的EC-EXOs在脑微血管内皮细胞激活中起关键作用，导致致命性血管阻塞。

靶向外泌体的疟疾治疗潜力

临床数据显示，疟疾患者血浆中EC-EXOs水平升高6倍，与疾病严重程度正相关。利用工程化EXOs递送抗疟药物（如青蒿素衍生物）显示出独特优势：天然靶向性可精准作用于iRBCs，而EXOs膜蛋白CD47能逃避免疫清除。更有趣的是，表达环子孢子蛋白（CSP）的纳米囊泡疫苗在小鼠模型中诱导了强效IgG2a抗体反应，为疫苗研发开辟新途径。

三维模型与未来方向

三维培养系统重现了EXOs介导的宿主-寄生虫互作时空动态。在类器官模型中，肝细胞来源的EXOs被证实可调控疟原虫休眠体激活。当前挑战在于解析EXOs异质性——单细胞测序揭示单个iRBC能分泌含不同miRNA谱的EXOs亚群，这要求建立更精确的分离标准（如微流控分选结合MISEV2023指南）。

方法学考量

差速超速离心仍是EXOs分离金标准，但最新密度梯度离心联合EXOGreen标记技术可将回收率提升至90%。质谱分析发现Pf-EXOs特征性标志物PfEMP1与RESA蛋白，这些分子作为诊断标记物的AUC值达0.89，显著优于传统厚血片法。

该领域亟待解决EXOs双刃剑效应：同一EXOs群体可能同时携带促炎因子IL-6和免疫抑制分子TGF-β。未来需开发时空可控的EXOs编辑工具（如CRISPR-Cas9修饰的工程化EXOs），以实现疟疾治疗从"广谱杀伤"到"精准调控"的范式转变。