甘草查尔酮与异黄酮类成分抗棘阿米巴作用机制研究：靶向NAD+与甾醇代谢通路的新发现

针对棘阿米巴感染缺乏特效药物的难题，上海交通大学医学院研究人员通过筛选甘草活性成分，发现异甘草素(ISL)和光甘草定(GLA)可剂量依赖性抑制棘阿米巴滋养体生长，并揭示其分别通过调控NAD+代谢和甾醇代谢通路诱导细胞凋亡。该研究为开发新型抗寄生虫药物提供了重要靶点。

　　

在全球范围内，由棘阿米巴(Acanthamoeba)引起的角膜炎和肉芽肿性脑炎等感染性疾病日益严峻，世界卫生组织(WHO)已将其列为公共卫生问题。然而，现有治疗手段效果有限，且缺乏特异性靶向药物。这一困境促使上海交通大学医学院的研究团队将目光投向传统中药甘草，试图从中挖掘具有抗寄生虫活性的天然化合物。

研究人员在《Phytomedicine》发表的最新研究中，系统评估了甘草中8种活性成分的抗棘阿米巴效果。通过细胞活力检测(CellTiter-Glo)、流式细胞术、线粒体功能探针(JC-1/mtSOX)和转录组测序等技术，发现异甘草素(Isoliquiritigenin, ISL)和光甘草定(Glabridin, GLA)展现出显著抑制效果。实验采用人角膜上皮细胞(HCEC)和结肠癌细胞(Caco-2)评估化合物安全性，并通过共培养模型验证其对宿主细胞的保护作用。

研究结果显示，ISL和GLA以剂量和时间依赖性方式显著降低棘阿米巴滋养体活力，IC₅₀值分别为53.71 μM和8.59 μM。Hoechst 33342/PI双染和caspase-3检测证实两种成分可诱导典型凋亡特征，包括染色质凝集和 caspase-3表达上调1.6-2.1倍。机制研究发现：

NAD⁺代谢调控：ISL通过上调NAMPT(烟酰胺磷酸核糖转移酶)、NMNAT(烟酰胺核苷酸腺苷酰转移酶)和Sir2(沉默调节蛋白)表达，同时降低NAD⁺/NADH比值(1.17→0.43)，扰乱氧化还原平衡。

甾醇代谢干预：GLA显著下调SC5D(固醇C5-去饱和酶)、DHCR7(7-脱氢胆固醇还原酶)等关键酶表达，使7-脱氢胆固醇(7-DHC)水平降低，破坏细胞膜完整性。

线粒体功能障碍：两种化合物均导致线粒体膜电位下降(红绿荧光比从5.41降至0.43)，线粒体ROS生成增加2.14-2.89倍，伴随超氧化物歧化酶(SOD)活性降低37.7-65.7%。

在讨论部分，作者指出这是首次揭示ISL通过NAD⁺/PARPs/SIRTs通路、GLA通过甾醇代谢途径发挥抗棘阿米巴作用。特别是GLA对7-DHC合成的抑制，为靶向寄生虫特有代谢途径的药物设计提供了新思路。该研究不仅为临床棘阿米巴感染提供了潜在治疗候选物，其揭示的代谢调控机制也为其他寄生虫病研究提供了范式参考。