玉叶金花抗甲型流感病毒作用机制：基于TLR/MyD88/NF-κB信号通路的体外与体内研究

本研究针对甲型流感病毒(IAV)高致病性与现有药物耐药性问题，通过体外(CCK-8法)和体内实验(小鼠模型)结合网络药理学与HPLC-Q-TOF-MS技术，揭示玉叶金花(YYJH)通过调控TLR/MyD88/NF-κB通路抑制病毒复制(CC50达42.83 mg/ml)并减轻炎症风暴(IL-6/TNF-α↓ IFN-γ↑)，为中药抗流感提供新策略。

　　

流感病毒每年造成全球数十万人死亡，其中甲型流感病毒(IAV)因其高变异性和耐药性成为防控难点。现有神经氨酸酶抑制剂如奥司他韦面临耐药率上升困境，而传统中药多靶点作用特点为抗流感药物研发提供新思路。玉叶金花(YYJH)作为壮药代表，虽在临床联合用药中显示疗效，但其单独抗IAV机制尚未明确。

广州中医药大学广东省中医药应急研究重点实验室的研究团队在《Phytomedicine》发表研究，通过CCK-8法检测细胞毒性(CC₅₀ MDCK细胞42.83 mg/ml)、小鼠生存实验(12.34 g/kg/d剂量使死亡率显著降低)、HPLC-Q-TOF-MS鉴定37种活性成分，结合网络药理学预测与WB验证，系统阐明YYJH抗IAV机制。

关键技术方法

1. 体外采用CCK-8评估YYJH对MDCK/A549细胞的毒性及抗病毒活性

2. 建立IAV感染BALB/c小鼠模型监测肺指数/病理变化

3. HPLC-Q-TOF-MS结合自建中药库鉴定活性成分

4. 网络药理学构建"成分-靶点-通路"网络预测TLR通路

5. WB/免疫荧光验证TLR4/7-MyD88-NF-κB蛋白表达

主要结果

Abstract

• 体外证实YYJH无细胞毒性且剂量依赖性抑制IAV复制周期各阶段

• 动物实验显示治疗组小鼠生存期延长，肺组织病理损伤减轻

• 下调IL-6/IL-10/TNF-α等炎症因子，上调IFN-γ改善免疫失衡

Introduction

• 揭示TLR7/4-MyD88-NF-κB通路是YYJH调控关键，抑制该通路可阻断"细胞因子风暴"

Methods

• 液相色谱鉴定出37种成分，网络分析锁定55个潜在靶点

• WB证实YYJH显著降低肺组织TLR4/7、MyD88及p-NF-κB表达

Discussion

• 首次明确YYJH通过多成分协同作用于TLR通路实现抗病毒/抗炎双重效应

该研究不仅为YYJH临床单独用药提供理论依据，更创新性地将网络药理学与经典实验验证结合，揭示中药多靶点作用模式。特别值得注意的是，YYJH在12.34 g/kg/d剂量下仍保持良好安全性，其通过调控先天免疫信号通路而非直接杀毒的作用机制，为应对病毒耐药性提供新思路。研究获得广州市中医药重大项目(2025CX011)等基金支持，相关发现已应用于中药复方制剂开发。