胰腺癌神经侵袭的细胞亚型解析：单细胞与空间转录组学揭示TGFBI+雪旺细胞的关键作用

本研究针对胰腺导管腺癌(PDAC)高发神经侵袭(NI)的临床难题，通过整合单细胞/核RNA测序(sc/snRNA-seq)与空间转录组学(ST)技术，系统解析了62例PDAC样本的微环境异质性。研究人员发现低NI组织富含三级淋巴结构(TLS)，而高NI组织中NLRP3+肿瘤相关巨噬细胞(TAM)和肌成纤维细胞(myCAF)包围侵袭神经，并首次鉴定出促进NI的TGFBI+雪旺细胞亚群。该成果发表于《Cancer Cell》，为靶向神经微环境的治疗策略提供了新靶点。

　　

胰腺癌被称为"癌中之王"，其五年生存率不足10%，而神经侵袭(NI)作为独立预后因素，在80-100%的胰腺导管腺癌(PDAC)病例中出现。尽管既往研究揭示了癌细胞与神经的互作机制，但肿瘤相关神经的微环境组成及其在NI中的作用始终是未解之谜。传统技术难以捕捉神经微环境的时空异质性，而PDAC中雪旺细胞的异质性及其功能更是一片空白。

深圳湾实验室肿瘤研究所的研究团队在《Cancer Cell》发表突破性研究，通过整合sc/snRNA-seq和ST技术，绘制了25例PDAC患者的62个样本单细胞图谱。研究发现低NI组织富含三级淋巴结构(TLS)，与未侵袭神经共定位；而高NI组织中，NLRP3⁺巨噬细胞和α-SMA⁺成纤维细胞(myCAF)形成促炎微环境包围侵袭神经。空间分析首次鉴定出NRP2⁺神经内膜成纤维细胞和TGFBI⁺雪旺细胞亚群，后者通过TGF-β信号激活促进癌细胞迁移。研究还发现基底样和GABRP⁺恶性亚型具有更强的NI潜能，为临床干预提供了新靶点。

关键技术包括：1)25例PDAC患者的62个样本单细胞/核转录组测序；2)10x Visium空间转录组解析神经微环境；3)多重免疫组化(mIHC)验证关键发现；4)体外共培养实验证实TGFBI⁺雪旺细胞的促迁移功能。

主要结果

恶性亚型展现差异化侵袭潜能

通过CNV分析区分恶性与非恶性导管细胞，鉴定出9个恶性亚群。基底样(D09_Ductal-CEACAM6)和神经反应性(D04_Ductal-GABRP)亚型在侵袭神经前沿富集，前者高表达EMT相关基因，后者特异性表达γ-氨基丁酸受体π亚基(GABRP)。空间分析显示神经内分泌样D02_Ductal-APOA2亚型与低NI相关，其脂代谢特征可能抑制侵袭。

神经侵袭状态的微环境差异

Ro/e分析揭示低NI组织富含生发中心B细胞(B03_GCB-RGS13)和效应记忆T细胞(T14_CD8_Temra-CX3CR1)，这些细胞在TLS中克隆扩增。高NI组织则富集NLRP3⁺巨噬细胞(M07_Macro-NLRP3)和调节性T细胞(T06_CD4_Treg-FOXP3)，形成免疫抑制微环境。COMMOT分析显示非侵袭神经周围存在CXCL12-CXCR4介导的淋巴细胞招募信号。

神经内微环境的细胞组成

空间分解发现神经内主要存在三种细胞：1)NRP2⁺成纤维细胞(F07_Fibro-NRP2)，特异性表达轴突导向基因；2)LYVE1⁺组织驻留巨噬细胞(M08_Macro-LYVE1)在非侵袭神经中占优；3)SPP1⁺修复型巨噬细胞(M10_Macro-SPP1)在侵袭神经中增加。RNA速率分析表明后者可能由前者转化而来。

雪旺细胞亚群的功能解析

鉴定出三种雪旺细胞亚型：髓鞘形成型(S01_Schwann-ABCA8)、TGFBI⁺转化型(S02_Schwann-TGFBI)和修复型(S03_Schwann-SERPINA3)。mIHC证实TGFBI⁺亚群位于侵袭前沿，其形成受TGF-β1调控——该信号主要来自周围NLRP3⁺巨噬细胞和myCAF。体外实验显示TGF-β1处理的雪旺细胞可增强PANC-1细胞迁移，该效应可被TGF-βRI抑制剂阻断。

结论与展望

该研究首次绘制了PDAC神经微环境的单细胞时空图谱，揭示TLS与神经的共存结构(NTS)可能具有免疫保护作用，而TGFBI⁺雪旺细胞通过重塑ECM促进NI。发现的NRP