超高效液相色谱-串联质谱法检测血浆中环丙酚的建立与验证及其在临床药代动力学研究中的应用

本文推荐一种基于UHPLC-MS/MS（超高效液相色谱-串联质谱）的血浆环丙酚（ciprofol）检测方法，通过甲醇蛋白沉淀前处理，结合Shim-pack C18色谱柱与5 mmol·L?1乙酸铵-甲醇梯度洗脱，实现5–5000 ng·mL?1线性范围（r>0.999），回收率87.24–97.77%，为新型麻醉药环丙酚的临床药代动力学（PK）研究提供高灵敏度（LLOQ 5 ng·mL?1）和特异性（RT 2.461 min）的分析工具。

　　

引言

环丙酚（HSK3486）作为新型静脉麻醉药，其2,6-二取代苯酚结构与丙泊酚相似，但GABA_A受体亲和力更强（效价高4–5倍），具有起效快、呼吸抑制轻等优势。然而，其血药浓度与麻醉深度直接相关，但国内外尚无标准检测方法。UHPLC-MS/MS技术凭借高灵敏度（ng·mL^?1级）和快速分析（单样2.5分钟）成为解决该技术瓶颈的关键。

材料与方法

仪器与试剂：采用Shimadzu LC-20ADXR色谱仪与AB Sciex 4500MD质谱联用系统，以环丙酚-d₆为内标。色谱条件：C₁₈柱（3 μm, 2.1×150 mm），5 mmol·L^?1乙酸铵（A）-甲醇（B）梯度洗脱（0–0.1 min 25%B→0.5 min 95%B），流速0.4 mL·min^?1。质谱条件：负离子ESI模式，监测离子对m/z 203.100→175.000（环丙酚）与m/z 209.100→181.100（内标）。样本处理：150 μL血浆经甲醇（3:1）蛋白沉淀，离心后上清用50%甲醇稀释5倍进样。

结果

方法学验证：

• 特异性：空白血浆无干扰，环丙酚与内标保留时间分别为2.461 min与2.455 min。
• 线性与LLOQ：5–5000 ng·mL^?1范围内r>0.999，LLOQ为5 ng·mL^?1（S/N≥10）。
• 精密度与准确度：批内/批间RSD≤8.28%，RE ?2.15%至6.03%。
• 稳定性：血浆样本经3次冻融、室温12小时或?20°C保存4周仍稳定（RE±15%）。

临床应用：6例全麻患者数据显示，单次给药后C_max达895.57±109.55 ng·mL^?1，清除率43.13±6.13 L·h^?1，与文献报道的健康人群数据存在差异，提示麻醉人群代谢特性需进一步研究。

讨论

技术优化：对比甲酸与乙酸铵体系，发现5 mmol·L^?1乙酸铵可提升响应50%；甲醇沉淀（3:1）结合50%甲醇稀释有效降低基质效应（ME 116.07–117.60%）。创新点：首次采用环丙酚-d₆内标，较传统内标（如麝香草酚）更匹配理化性质。局限性：样本量小（n=6）且未涵盖肝肾功能差异影响。

结论

本研究建立的UHPLC-MS/MS方法满足环丙酚临床监测需求，为围术期个体化用药提供可靠工具。未来可通过多中心研究完善PK模型，结合AI技术优化给药方案。