p75NTR通过p-p65信号通路抑制TLR7/9诱导的CD21lo B细胞亚群扩增在自身免疫中的作用机制研究

本研究针对自身免疫性疾病中CD21lo B细胞亚群异常扩增的调控机制，揭示了神经生长因子受体p75NTR通过抑制TLR7/9信号通路下游的p-p65磷酸化，限制CD21lo B细胞亚群扩增及其促炎特性的新机制。中南大学研究人员通过体内外实验结合RNA-seq技术，发现p75NTR缺失会导致Tbx21等关键转录因子上调，为自身免疫性疾病的治疗提供了新靶点。

　　

在免疫系统精细调控的舞台上，B细胞亚群的平衡失调常是自身免疫疾病的"导火索"。近年来，一类表面标志CD21表达降低的B细胞（CD21^lo）引起了研究者关注——这群细胞在系统性红斑狼疮等疾病中异常扩增，表现出强烈的促炎特性，就像免疫系统中的"叛逆分子"。更棘手的是，它们对Toll样受体7/9（TLR7/9）的刺激异常敏感，而TLR信号通路正是许多自身免疫反应的"开关"。与此同时，神经生长因子受体p75^NTR这个原本在神经系统"履职"的蛋白，被发现也在免疫细胞中"兼职"，但其在B细胞中的功能仍如"雾里看花"。

中南大学湘雅二医院麻醉科研究所的研究团队在《iScience》发表的研究，如同拨开迷雾的探照灯。研究人员通过构建B细胞特异性p75^NTR敲除小鼠，结合TLR7/9激动剂刺激和RNA-seq等技术，发现p75^NTR竟是CD21^lo B细胞扩增的"刹车踏板"。当用TLR7/9激动剂CpG-B或R848刺激B细胞时，p75^NTR表达显著上调，就像细胞自启的"防护程序"；而敲除p75^NTR后，CD21^lo B细胞亚群如同脱缰野马，扩增程度加剧，并分泌更多IL-6和TNF-α等炎症因子。在模拟人类狼疮的降植烷（pristane）诱导小鼠模型中，这一现象得到完美复现——p75^NTR缺失小鼠的脾脏中，这群"危险分子"的占比显著增加。

关键技术方法包括：通过磁珠分选获得高纯度B细胞；采用TLR7/9激动剂建立体外刺激模型；利用降植烷诱导建立自身免疫小鼠模型；运用流式细胞术分析细胞表型；通过RNA-seq和qPCR进行转录组验证；采用Western blot检测信号通路蛋白表达。

P75^NTR表达增加与CD21^lo B细胞扩增的关系

研究发现TLR7/9激动剂刺激24小时后，B细胞中p75^NTR阳性比例和平均荧光强度均显著增加，Western blot和免疫荧光证实蛋白水平同步升高。有趣的是，此时CD21^lo B细胞亚群也开始扩增，暗示两者存在动态平衡关系。

p75^NTR缺失加剧CD21^lo B细胞表型

在B细胞特异性p75^NTR敲除小鼠（CD19cre-p75^f/f）中，TLR7/9刺激导致的CD21^lo B细胞扩增更为显著。这群细胞还表现出CD44和CD86等共刺激分子表达升高，IL-6和TNF-α分泌增加，活脱脱一副"高度警戒"状态。

转录组学揭示关键调控网络

RNA-seq分析显示p75^NTR缺失导致389个差异表达基因，包括调控B细胞活化的关键转录因子Tbx21上调。KEGG分析提示这些基因富集于Th1/Th2分化、TNF和JAK-STAT等信号通路，构成了复杂的调控网络。

p-p65信号通路的关键作用

Western blot结果显示p75^NTR缺失会增强TLR7/9诱导的p65磷酸化（p-p65），但不影响Traf6表达，表明p75^NTR可能通过调控NF-κB信号通路下游事件来限制CD21^lo B细胞扩增。

这项研究首次阐明了p75^NTR在B细胞亚群稳态维持中的关键作用，如同发现了一个新的免疫"调节旋钮"。当TLR7/9信号过度激活时，p75^NTR表达上调，通过抑制p-p65等信号分子来防止CD21^lo B细胞的失控扩增。这一发现不仅解释了为何某些自身免疫病患者中p75^NTR表达异常，更提供了通过靶向p75^NTR-proBDNF（前脑源性神经营养因子）轴来干预疾病的新思路。未来研究可探索如何利用这一机制，开发针对系统性红斑狼疮等疾病的新型免疫调节策略，让这些"叛逆"的B细胞亚群重新回到可控范围内。