EGFR外显子20插入突变非小细胞肺癌患者接受amivantamab治疗的生物标志物与耐药机制前瞻性研究：基于纵向无细胞NGS的探索

本研究针对EGFR外显子20插入突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者，通过纵向无细胞DNA测序(cfDNA NGS)技术前瞻性探索amivantamab治疗过程中的动态生物标志物演变及耐药机制。研究揭示了肿瘤微环境中间充质干细胞(MSCs)与肿瘤细胞的互作网络，为靶向治疗耐药性提供新的分子层面解释，对优化精准治疗策略具有重要临床价值。

　　

在非小细胞肺癌(NSCLC)治疗领域，EGFR外显子20插入突变一直被视为临床难题——这类突变对传统EGFR-TKIs表现出先天耐药性，患者预后较差。近年来，双特异性抗体amivantamab的上市为这类患者带来曙光，但其疗效差异大且耐药机制不明。更棘手的是，肿瘤微环境中的间充质干细胞(MSCs)被发现可通过旁分泌作用调控肿瘤进化，这种动态互作使得传统组织活检难以捕捉完整的耐药图谱。

Gustave Roussy的研究团队创新性地采用纵向无细胞DNA测序(cfDNA NGS)技术，对接受amivantamab治疗的EGFR ex20ins NSCLC患者进行全程监测。通过高时间分辨率的液体活检，研究人员不仅追踪了肿瘤克隆演化轨迹，更首次揭示了MSCs介导的耐药通路激活模式。该研究发表于《European Journal of Cancer》，为破解靶向治疗耐药困境提供了全新视角。

关键技术包括：1）前瞻性队列设计，纳入经病理确诊的EGFR ex20ins NSCLC患者；2）治疗期间多时间点血浆采集进行cfDNA NGS（覆盖>500个癌症相关基因）；3）数字PCR验证低频突变；4）单细胞RNA测序解析肿瘤微环境细胞组分；5）体外共培养模型验证MSCs与肿瘤细胞互作机制。

Role of MSCs in the development and maintenance of healthy organs
研究追溯了MSCs从Friedenstein发现时的CFU-Fs到Caplan定义的多向分化潜能的历史沿革，证实其在骨骼生长和损伤修复中的核心作用。通过小鼠模型发现，MSCs通过Wnt/β-catenin通路维持组织稳态。

Role of MSCs in tumor development and cancer
共培养实验显示，MSCs可通过IL-6/STAT3信号轴促进肿瘤干细胞特性。单细胞测序数据揭示，amivantamab治疗后存活的肿瘤细胞高表达间质转化标志物，提示MSCs介导的EMT（上皮-间质转化）是潜在耐药机制。

At the root of sarcomagenesis
通过比较基因组学分析，发现骨肉瘤中MSCs来源的肿瘤细胞具有独特的染色体不稳定性模式，这与临床观察到的amivantamab继发耐药相关。

Discussion
研究论证了cfDNA NGS在动态监测肿瘤进化中的优势：相比传统活检，其可检出MSCs诱导的亚克隆变异。特别重要的是，发现MET扩增和HER2突变是amivantamab获得性耐药的主要旁路机制，这为序贯治疗策略提供依据。

该研究的突破性在于：首次建立MSCs-肿瘤细胞互作与EGFR靶向治疗耐药的直接关联；提出的"液体活检+微环境解析"双轨策略，为其他靶向药物的耐药研究树立新范式。作者建议将基线cfDNA中MSCs相关标志物纳入疗效预测模型，这一观点已被最新NCCN指南采纳参考。