循环肿瘤DNA中HAND2和GPM6A甲基化：结直肠癌无创诊断与治疗监测的新靶点

本研究针对结直肠癌(CRC)早期诊断难题，通过分析40例患者治疗前后血浆样本中HAND2和GPM6A基因的ctDNA甲基化水平，发现二者联合检测的AUC达0.9213，显著优于传统标志物CEA/CA19-9，为CRC无创筛查提供了新型表观遗传学标志物。

　　

在全球癌症负担中，结直肠癌(CRC)长期占据致死率前三的席位，仅2024年美国就预计新增15.2万病例。尽管结肠镜被视为金标准，但其侵入性和低依从性促使科学家寻找更友好的解决方案。液体活检技术应运而生，其中循环肿瘤DNA(ctDNA)因能捕获肿瘤特异性表观遗传改变而备受关注。

伊朗伊斯兰阿扎德大学基础科学系的研究团队将目光投向两个尚未充分探索的基因——HAND2（心脏和神经嵴衍生因子2）和GPM6A（糖蛋白M6A）。这两个基因在CRC中呈现显著高甲基化和低表达特征，前期生物信息学分析提示它们可能参与ERK信号通路调控和细胞黏附过程。研究人员通过40例CRC患者治疗前后的动态监测，揭示了这两个表观遗传标记的临床价值。

研究采用的关键技术包括：从血浆中提取ctDNA（QIAamp试剂盒）、亚硫酸盐转化（EpiJet Kit）、定量甲基化特异性PCR（qMS-PCR）检测目标基因甲基化水平，并利用TCGA数据库进行生存分析。所有实验均设置三重重复，采用ACTB作为内参基因，通过5折交叉验证评估模型稳定性。

ctDNA浓度与甲基化水平
研究发现治疗前患者ctDNA浓度（57.19±10.23 ng/μL）显著高于治疗后（22.01±6.78 ng/μL）和健康对照组（33.76±8.21 ng/μL）。HAND2甲基化水平在治疗前后分别为55.75%±26.75和37.98%±22.93（p<0.001），而GPM6A从72.93%±18.06降至49.48%±16.83（p<0.001）。值得注意的是，GPM6A甲基化呈现治疗前后正相关（r=0.3181），提示其可能反映肿瘤场效应。

诊断效能分析

联合模型AUC达0.9213（95%CI:0.8569-0.9856），灵敏度100%/特异性97.5%，显著优于传统标志物CEA（灵敏度70%）和CA19-9（特异性92%）。

生存分析
TCGA数据显示，在直肠腺癌（READ）中GPM6A高甲基化患者呈现生存劣势趋势（HR=2.7, p=0.0531），而结肠腺癌（COAD）未见显著关联，提示这两个解剖部位可能存在不同的表观遗传调控机制。

这项研究首次系统论证了HAND2/GPM6A甲基化作为CRC液体活检标志物的价值。其创新性体现在：1）发现GPM6A甲基化的持续性特征可能用于复发监测；2）证实表观遗传标记比突变标记更稳定；3）建立的高精度模型为无创筛查提供新选择。未来需要在多中心队列中验证这些发现，并探索其与现有筛查策略（如SEPT9检测）的协同效应。

研究也存在若干局限：样本量较小（n=40）、对照组未全部接受结肠镜验证、缺乏腺瘤阶段样本等。但不可否认，这项工作为CRC早诊早治开辟了新路径，特别是对于内镜检查禁忌人群具有重要临床意义。随着表观遗传学研究的深入，这类"分子镜检"技术或将重塑癌症筛查格局。