RBM15通过m6A修饰调控ACSL4表达促进心肌细胞缺氧/复氧诱导的铁死亡

本研究针对急性心肌梗死(AMI)后心肌缺血再灌注(I/R)损伤的机制展开探索，发现RNA结合基序蛋白15(RBM15)通过介导酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的m6A甲基化修饰，加剧缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞铁死亡。重庆医科大学附属璧山医院的研究团队采用AC16心肌细胞H/R模型，结合m6A定量分析、RNA免疫共沉淀等技术，首次揭示RBM15/ACSL4轴在心肌I/R损伤中的关键作用，为AMI治疗提供了新靶点。

　　

心血管疾病是全球首要死因，其中急性心肌梗死(AMI)因其高致死率备受关注。尽管及时恢复血流灌注是治疗AMI的关键，但随之而来的心肌缺血再灌注(I/R)损伤却成为临床难题。近年研究发现，铁死亡(Ferroptosis)这种新型程序性细胞死亡方式在心肌I/R损伤中扮演重要角色，其特征是铁离子蓄积、谷胱甘肽耗竭和脂质过氧化。然而，铁死亡在心肌损伤中的精确调控机制尚不明确，特别是表观遗传修饰如何参与这一过程仍有待探索。

重庆医科大学附属璧山医院老年医学科的Yi Cheng等研究人员在《Hereditas》发表的研究，首次揭示了RNA结合基序蛋白15(RBM15)通过N⁶-甲基腺苷(m⁶A)修饰调控酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)表达，进而影响心肌细胞铁死亡的分子机制。这项研究不仅为理解心肌I/R损伤提供了新视角，更为开发靶向干预策略奠定了理论基础。

研究人员采用多种关键技术方法：收集65例AMI患者血清样本进行生物标志物分析；建立AC16心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型模拟I/R损伤；运用CCK-8检测细胞活力，商业试剂盒测定氧化应激指标；通过RNA免疫共沉淀(RIP)和甲基化RNA免疫共沉淀(meRIP)验证RBM15与ACSL4的相互作用；采用双荧光素酶报告基因和放线菌素D处理分析mRNA稳定性；最后通过小鼠AMI模型进行体内验证。

研究结果部分，首先在"RBM15 was upregulated in AMI patients' serums"中发现，AMI患者血清中RBM15表达显著升高，且与心肌损伤标志物cTnI和CK-MB呈正相关，ROC曲线下面积达0.9754，显示其作为诊断标志物的潜力。

"RBM15 knockdown inhibited H/R-induced oxidative injury in AC16 cells"部分显示，沉默RBM15可显著改善H/R导致的细胞活力下降，降低乳酸脱氢酶(LDH)释放、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平，同时提高超氧化物歧化酶(SOD)活性。

在"Silencing of RBM15 inhibited H/R-induced ferroptosis in AC16 cells"中，研究发现RBM15敲除降低了H/R诱导的铁离子(Fe²⁺)蓄积，上调了谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链1(FTH1)表达，同时下调了ACSL4和核受体共激活因子4(NCOA4)水平，改善了氧化型谷胱甘肽(GSSG)/还原型谷胱甘肽(GSH)比值。

"RBM15 mediated m⁶A modification of ACSL4"部分通过生物信息学预测和实验验证，证实RBM15通过m⁶A修饰增强ACSL4 mRNA稳定性。meRIP和双荧光素酶报告实验显示，RBM15可直接结合ACSL4并促进其m⁶A修饰，而放线菌素D处理证实RBM15调控ACSL4 mRNA稳定性。

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最后，"Overexpression of ACSL4 restored the effect of RBM15 knockdown"证明ACSL4过表达可逆转RBM15沉默对H/R损伤的保护作用，验证了RBM15/ACSL4轴的调控关系。

这项研究系统阐明了RBM15通过m⁶A依赖性机制调控ACSL4表达，进而促进心肌细胞铁死亡的分子通路。

研究不仅首次将m⁶A修饰与心肌铁死亡联系起来，更为重要的是，发现RBM15和ACSL4可作为AMI治疗的潜在靶点。临床意义在于，针对这一通路的干预可能减轻心肌I/R损伤，改善AMI患者预后。未来研究可进一步探索靶向RBM15/ACSL4轴的小分子化合物，为开发新型心脏保护策略提供方向。