奥地利东部首次在马厩蝇(Stomoxys calcitrans)中检测到马肝炎病毒RNA：揭示潜在机械传播途径

本研究针对马肝炎病毒(EqHV)传播机制未明的科学问题，通过筛查奥地利东部马场中吸血性马厩蝇(S. calcitrans)的头部、胸部和腹部EqHV RNA，首次证实该昆虫可携带病毒RNA（最低感染率1.2%-3.9%），为EqHV的机械传播途径提供重要证据。发表于《BMC Veterinary Research》的成果对制定马科动物肝炎防控策略具有重要价值。

　　

马肝炎病毒(EqHV)作为黄病毒科(Flaviviridae)成员，在全球马群中感染率高达7.9%，可导致从亚临床感染到致命性肝炎的严重后果。尽管垂直传播和医源性传播已被证实，但流行病学数据显示存在未知的水平传播途径。这一科学谜团促使奥地利维也纳兽医大学(University of Veterinary Medicine Vienna)的研究团队将目光投向马场中常见的吸血昆虫——马厩蝇(S. calcitrans)，这种已知能机械传播马传染性贫血病毒的昆虫，是否可能成为EqHV的"隐形帮凶"？

研究人员在2021-2022年采用CO₂诱捕法从奥地利东部三个马场采集783只马厩蝇，创新性地将蝇体分为头胸部（含口器、附肢）和腹部两组。通过优化的蛋白酶K裂解结合实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术，检测到14个头胸部混合池（每组1-5只蝇）呈EqHV RNA阳性，阳性率呈现秋季高峰（9月1.2%，10月3.9%）。尤为关键的是，对应腹部样本检出率达67.5%（54/80），证实昆虫确实摄入了病毒污染血液。虽然Ct值接近检测限（36.8-42.3），但通过最大似然估计(MLE)计算的最低感染率表明，马厩蝇口器及体表可持续携带病毒RNA。

样本采集与处理
研究团队在维也纳兽医大学校园及周边30公里内两个马场设置诱捕点，采用BG-sentinel traps连续两年7-10月采集样本。蝇体经形态学鉴定后，用无菌技术分离头胸部（含翅膀、腿）与腹部，分别建立最多5只的混合池。通过优化组织裂解方案（钨珠破碎+蛋白酶K消化）和探针法RT-qPCR（靶向NS3基因），有效克服昆虫组织对核酸检测的抑制效应。

主要研究结果

1. 季节分布特征：阳性样本集中出现在秋季（9-10月），与马厩蝇活动高峰吻合。2022年检出范围扩展至7月，可能与当年气温较高（日均温9.4-27.9°C）相关。

2. 解剖学分布：病毒RNA在头胸部（含摄食器官）和腹部同时检出，排除单纯消化道残留的可能，提示口器污染和胸腔嗉囊 regurgitation（反流）可能是机械传播的关键环节。

3. 传播潜力评估：基于马匹最低感染剂量（13 RNA拷贝）和蝇类反流量（0.1μl）计算，理论上传病需宿主血液含1.3×10⁵ copies/mL病毒，而EqHV感染马匹病毒载量可达10⁸ copies/mL，满足传播条件。

讨论与意义
该研究首次将马厩蝇确立为EqHV的潜在机械传播媒介，解释了临床实践中难以追溯的感染病例。尽管未证实活病毒存在，但病毒RNA在昆虫摄食器官的持续检出，结合该物种频繁更换宿主的习性（单次吸血需2-4次尝试），为"蝇-马"传播链提供了流行病学基础。研究建议将马厩蝇防控纳入马场卫生管理，并提示需进一步研究泪液等非血液体液传播可能性——这源于团队发现阳性样本中部分蝇类未明显吸血，暗示其他接触传播途径的存在。

维也纳兽医大学的Vicky Frisch和Jessika-M.V. Cavalleri等学者在《BMC Veterinary Research》发表的这项成果，不仅为EqHV传播机制补上关键拼图，其建立的昆虫病毒筛查方法（如克服抑制效应的核酸提取方案）更为研究其他虫媒病毒提供了技术范式。随着气候变化延长昆虫活动期，这类研究对保障马匹健康的经济价值愈发凸显——据估算，仅因血液制品污染导致的EqHV感染，单匹马治疗成本就超过3000欧元。