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印尼本土植物乳杆菌M4产胰蛋白酶样蛋白酶(TLP)的优化、部分表征及其消化酶应用研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月19日 来源:Current Microbiology 2.3
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来自印度尼西亚的研究人员针对胰蛋白酶缺乏引发的健康问题,开展植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)M4产胰蛋白酶样蛋白酶(TLP)的发酵优化研究。通过响应面法(RSM)确定最佳培养基组成为1.96%葡萄糖、0.39%酵母提取物、1.97%脱脂乳、pH6.62,使酶活达0.281±0.012 mU/mL。经5000 MWCO超滤纯化后纯度提升11,075倍,活性达2,467 mU/mL。SDS-PAGE显示TLP含29/19 kDa亚基,在30-40°C、pH7-8时活性最佳,且受Zn2+/Ca2+/EDTA调控。该研究为消化酶补充剂开发提供新思路。
胰蛋白酶(Trypsin)作为消化系统的核心蛋白酶,不仅负责蛋白质水解,还能激活其他消化酶原。最新研究发现,源自印度尼西亚班贾尔马辛发酵门腾果的植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)M4菌株,能分泌具有胰蛋白酶类似功能的蛋白酶(TLP)。科研团队采用响应面法(RSM)中的中心复合设计,揭秘了TLP高产的最优条件:1.96%葡萄糖+0.39%酵母提取物+1.97%脱脂乳的培养基,在pH6.62环境下可产生0.281±0.012 mU/mL的酶活。
通过5000分子量截留超滤(MWCO)浓缩后,粗酶液华丽变身——纯度飙升11,075倍,活性突破2,467 mU/mL。电泳(SDS-PAGE)图谱显示,这个"蛋白剪刀"由29 kDa和19 kDa两个亚基组成,在30-40°C的体温舒适区保持稳定,且在弱碱性环境(pH7-8)展现最强切割力。有趣的是,金属离子像调音师般调控其活性:Zn2+和Ca2+是它的"激活开关",而螯合剂EDTA则会让酶活"打瞌睡"。这项研究不仅为消化酶缺乏者带来福音,更展现了微生物源酶制剂在健康领域的巨大潜力。
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