血清游离泛素作为2型糖尿病肾病早期诊断标志物的临床价值及其肾保护机制研究

本研究针对2型糖尿病肾病(DN)早期诊断标志物缺乏的临床难题，通过队列分析发现血清游离泛素(free Ub)水平与肾功能指标显著相关，可作为DN独立预测因子(AUC=0.930)。体外实验证实free Ub通过抑制高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡(Bax/Bcl2调控)发挥保护作用，为DN防治提供新靶点。

　　

糖尿病肾病(DN)作为2型糖尿病(T2DM)最严重的微血管并发症之一，约34.7%的T2DM患者会发展为DN，已成为终末期肾病(ESRD)的主要诱因。当前临床面临两大困境：一是早期诊断依赖尿白蛋白肌酐比(UACR)和估算肾小球滤过率(eGFR)等传统指标特异性不足；二是发病机制复杂，缺乏有效干预靶点。泛素(Ubiquitin, Ub)作为蛋白质降解系统的核心组分，其游离形式(free Ub)在多种疾病中呈现异常表达，但其在DN中的作用仍是未解之谜。

黑龙江省第二医院的研究团队在《BMC Nephrology》发表的重要研究，通过临床队列与细胞实验相结合的策略，首次系统评估了血清free Ub的临床价值并揭示其肾保护机制。研究采用回顾性队列分析250例T2DM患者(74例伴DN)，通过ELISA检测血清free Ub水平，结合Spearman相关性分析和Logistic回归评估其诊断价值。体外实验建立高糖(HG, 30 mM)诱导的HK-2细胞损伤模型，采用CCK-8、EdU染色、流式细胞术等技术分析free Ub(10-250 ng/mL)对细胞活力、增殖和凋亡的影响。

血清free Ub水平与肾功能的相关性
临床数据显示，DN组血清free Ub水平[10.26(2.83,17.25) ng/mL]显著低于单纯T2DM组17.83(10.11,35.01)。相关性分析揭示free Ub与SUA(r=-0.833)、BUN(r=-0.839)、UACR(r=-0.878)呈显著负相关，与eGFR(r=0.773)呈正相关(P均<0.05)。多因素Logistic回归证实free Ub是DN发生的独立影响因素(OR=0.575, 95%CI=0.383-0.864)。

free Ub的肾保护机制
高糖处理导致HK-2细胞活力下降(CCK-8)、增殖抑制(EdU阳性率降低)和凋亡增加(流式细胞术凋亡率升高)。50 ng/mL free Ub干预可逆转这些效应：下调促凋亡蛋白Bax(降低56%)和Cleaved-caspase-3(降低48%)，上调抗凋亡蛋白Bcl2(增加2.1倍)，同时抑制炎症因子IL-6和IL-1β释放(ELISA检测分别降低62%和58%)。

这项研究具有双重突破意义：临床方面，首次确立血清free Ub≤14.88 ng/dL可作为DN早期诊断阈值(敏感性95.95%，特异性76.70%)；机制层面，阐明free Ub通过调控凋亡通路减轻肾小管损伤。该成果为DN的早期筛查提供了新型生物标志物，并为开发基于Ub信号通路的靶向治疗策略奠定理论基础。未来研究需扩大样本量并探索free Ub在肾小球细胞中的作用，以更全面评估其临床应用潜力。