卢旺达传统药用植物抗呼吸道合胞病毒活性研究：以Senecio maranguensis提取物靶向病毒融合蛋白的机制探索

本研究通过民族药理学调查筛选卢旺达传统药用植物，发现14种植物提取物具有显著抗呼吸道合胞病毒(RSV)活性，其中Senecio maranguensis甲醇提取物通过靶向病毒F蛋白三聚体内部腔体的T335位点抑制病毒融合，EC50达6.9 μg/ml，为开发新型RSV治疗药物提供重要线索。

　　

呼吸道病毒感染是全球公共卫生的重要挑战，其中呼吸道合胞病毒(RSV)在儿童和老年人中引发严重下呼吸道疾病，但现有治疗手段仅限于利巴韦林雾化制剂。传统医学知识为药物开发提供了宝贵资源，卢旺达传统医师(THPs)使用多种植物治疗呼吸道感染的经验尚未系统验证。

瑞典哥德堡大学（University of Gothenburg）联合卢旺达大学的研究团队开展民族药理学调查，访谈40名THPs后筛选48种植物，通过分级萃取获得203种提取物。采用噬斑减少实验和细胞毒性检测，发现14种提取物具有抗RSV活性，其中Senecio maranguensis甲醇提取物展现出独特作用机制。该研究发表于《Phytomedicine Plus》。

关键技术包括：(1)民族药理学问卷调查确定植物使用频率；(2)顺序溶剂萃取(n-己烷、乙酸乙酯、甲醇、水)制备提取物；(3)HEp-2细胞培养体系中的RSV A2株噬斑减少实验；(4)时间依赖性添加实验分析作用阶段；(5)耐药病毒株选育及F蛋白基因测序。

【民族药理学调查】
访谈显示85种植物用于呼吸道疾病治疗，使用频率最高的是Eucalyptus globulus(100%)和Ocimum gratissimum(85%)。48种选定植物中，Asteraceae科占比最高(15.5%)，叶片是最常用部位(表1)。

【抗RSV筛选】
203种提取物中，10种甲醇和4种水提取物显示显著活性(表2)。Conyza sumatrensis甲醇提取物EC₅₀为3 μg/ml，SI>166.7；Rumex usambarensis水提取物EC₅₀18.1 μg/ml。值得注意的是，仅2.5%THPs推荐的Senecio maranguensis表现出强效抗RSV活性。

【Senecio maranguensis作用机制】
该提取物(EC₅₀6.9 μg/ml, CC₅₀310 μg/ml)可减少1.8 log₁₀病毒产量(图1B)，并改变噬斑形态抑制合胞体形成(图1C-D)。时间添加实验显示其对病毒吸附/侵入阶段抑制最强(图2B)。耐药病毒株出现F蛋白T335M突变(图2D)，该位点位于融合肽(F137)附近的三聚体内部腔体，与已知融合抑制剂靶点区域重叠。LC-MS提示提取物含二咖啡酰奎宁酸等活性成分。

这项研究首次系统验证了卢旺达传统药用植物的抗RSV潜力，发现11种植物提取物具有治疗价值。Senecio maranguensis通过靶向F蛋白三聚体腔体抑制病毒融合的创新机制，为开发新型RSV抑制剂提供了分子模板。尽管该植物含潜在肝毒性吡咯里西啶生物碱，但活性成分与毒性物质的分离系数达45倍，具备药物开发可行性。研究结果不仅证实传统医学知识的科学价值，也为应对RSV这一重要呼吸道病原体提供了新的干预策略。