基于肠道菌群-P2×7R/NLRP3通路探讨逍遥散改善卒中后抑郁小鼠行为的作用机制

本研究针对卒中后抑郁(PSD)肠道菌群失衡的核心病理环节，通过构建PSD小鼠模型，结合行为学评估、16S rRNA测序和代谢组学分析，首次揭示逍遥散(XYS)通过调控Faecalibaculum等优势菌属、修复肠黏膜屏障，抑制P2×7R/NLRP3炎症小体激活，降低IL-1β等炎性因子水平，从而改善抑郁样行为。该研究为中医药干预PSD提供了微生物-肠-脑轴(MGB)调控新证据。

　　

卒中后抑郁(PSD)作为脑卒中最常见的并发症，不仅显著影响患者神经功能康复，更与高达50%的自杀风险密切相关。随着微生物组学的发展，科学家们发现肠道菌群通过微生物-肠-脑轴(Microbiota-Gut-Brain Axis, MGB)与中枢神经系统双向交流，而PSD患者普遍存在Faecalibaculum等有益菌减少、促炎菌增多的菌群失衡现象。更关键的是，嘌呤能受体P2×7R/NLRP3炎症小体通路的过度激活，会促进白细胞介素-1β(IL-1β)释放，加剧神经炎症反应。传统中药逍遥散(XYS)虽在临床显示抗抑郁疗效，但其是否通过调控肠道微生态发挥PSD干预作用尚属未知。

针对这一科学问题，暨南大学的研究团队在《Phytomedicine》发表的研究中，综合运用PSD小鼠模型、行为学测试、透射电镜观察、ELISA检测、Western blotting、16S rRNA高通量测序和非靶向代谢组学等技术，结合粪菌移植(FMT)实验，系统揭示了XYS的多靶点作用机制。

主要技术方法
研究采用C57BL/6小鼠构建PSD模型，通过悬尾实验(TST)和强迫游泳实验(FST)评估行为学改变；采用HE染色和透射电镜观察结肠黏膜超微结构；通过ELISA检测血清和海马体炎性因子；运用Western blotting分析P2×7R/NLRP3通路蛋白表达；结合16S rRNA测序和LC-MS代谢组学解析菌群-代谢物变化；最后通过FMT验证菌群因果作用。

研究结果

1. 行为学改善：XYS显著缩短PSD小鼠TST和FST不动时间(p<0.01)，修复结肠黏膜紧密连接结构。
2. 抗炎机制：下调海马体和结肠中P2×7R、NLRP3蛋白表达(p<0.05)，降低IL-1β、IL-6水平达40%-60%。
3. 菌群调控：使Ligullacoccus等有害菌降低2-3倍，Faecalibaculum等有益菌增加5-8倍；同步调节对羟基苯甲酸甲酯等12种差异代谢物。
4. FMT验证：移植XYS处理菌群可再现抗抑郁效果，而PSD菌群则诱发正常小鼠出现抑郁样行为。

结论与意义
该研究首次阐明XYS通过"菌群-代谢物-P2×7R/NLRP3"级联反应改善PSD的新机制：①特异性富集产短链脂肪酸菌群，修复肠屏障；②抑制P2×7R介导的NLRP3炎症小体活化，阻断IL-1β释放；③调节色氨酸-犬尿氨酸代谢平衡。这不仅为中医药现代化研究提供了微生物组学范式，更为开发靶向MGB轴的抗抑郁药物奠定了理论基础。研究团队特别指出，甲基化修饰的天然化合物如芍药苷(Paeoniflorin)可能是XYS发挥菌群调控作用的关键药效物质，这为后续精准用药提供了方向。