水生环境中被忽视的肠杆菌目细菌：抗生素耐药性的潜在宿主及其生态健康意义

本研究聚焦水生环境中常被忽视的肠杆菌目细菌（Enterobacterales），揭示了克罗诺杆菌（Cronobacter sakazakii）、克吕沃菌（Kluyvera intermedia）等6种罕见菌种的多重耐药性（MDR）和生物膜形成能力。通过ERIC-PCR指纹图谱和ARGs检测，发现blaTEM-1、blaCTX-M等β-内酰胺酶基因广泛存在，且基因组可塑性与耐药性呈负相关。该研究为环境耐药菌监测提供了新视角，发表于《Scientific Reports》。

　　

抗生素耐药性（AMR）已成为全球公共卫生的重大威胁，而水生环境作为耐药基因（ARGs）的“储藏库”长期被低估。传统监测多集中于大肠杆菌等常见肠杆菌目，却忽视了克罗诺杆菌、克吕沃菌等罕见菌种的潜在风险。这些“低调”的病原体不仅可能引发机会性感染，更可能通过水平基因转移传播耐药性，加剧医疗负担。

为解决这一问题，罗马尼亚巴比什-波雅依大学（Babes-Bolyai University）分子生物学与生物技术系的研究团队对14株来自地表水、地下水和废水的罕见肠杆菌目菌株展开系统研究。通过表型耐药分析、ARGs筛查和生物膜实验，结合ERIC-PCR基因组指纹技术，首次揭示了这些环境菌株的耐药谱系与基因组特征之间的关联。研究成果发表于《Scientific Reports》，为环境耐药性监测提供了新的靶点。

研究采用四项关键技术：1）Kirby-Bauer法检测对10种抗生素的敏感性；2）PCR筛查24种ARGs（包括bla_TEM-1、bla_CTX-M等）及I类整合子intI1基因；3）结晶紫染色法定量生物膜形成能力；4）ERIC-PCR指纹图谱分析基因组多样性。

抗生素敏感性
所有菌株均对厄他培南敏感，但73%对氨苄西林耐药，57%对四环素耐药。10株（71%）表现为MDR，其中拉乌尔菌（Raoultella ornithinolytica）EWWI-42同时耐受7种抗生素。值得注意的是，一株菌对亚胺培南呈现中介耐药，暗示碳青霉烯类抗生素的选择压力正在形成。

ARGs分布特征
bla_TEM-1（检出率50%）和bla_CTX-M（21%）是最常见的β-内酰胺酶基因。克罗诺杆菌EWWI-65同时携带tetA/B/C和sul1/2基因，呈现“基因盒”式耐药特征。仅一株勒克菌（Leclercia adecarboxylata）携带intI1整合子，表明水平基因转移在此类菌株中并非主要耐药机制。

生物膜与基因组特征
50%菌株具有弱生物膜形成能力，但未发现强生物膜生产者。ERIC-PCR显示菌株间基因组差异显著（6-12条条带），且条带数量与耐药性呈显著负相关（r=-0.784）。例如，含12条带的拉乌尔菌（Raoultella terrigena）ESWU-88仅对两种抗生素耐药，而仅含6条带的克罗诺杆菌EWWI-65却耐受6种药物。

该研究证实，水生环境中的非常见肠杆菌目细菌是ARGs的重要载体，其基因组可塑性可能通过“适应性权衡”影响耐药表型。这一发现挑战了传统认知——通常认为基因组复杂度会促进耐药性进化，而本研究却揭示高ER