Bta-miR-200b通过靶向PTEN/AKT/NF-κB轴缓解LPS诱导的奶牛子宫内膜炎的机制研究

本研究针对奶牛子宫内膜炎造成的严重经济损失，首次揭示bta-miR-200b通过调控PTEN/AKT/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的炎症损伤和细胞凋亡。研究人员发现过表达bta-miR-200b可显著降低p65磷酸化水平，提升Bcl-2/Bax比值，为miRNA靶向治疗子宫内膜炎提供了理论依据。

　　

在奶牛养殖业中，子宫内膜炎是导致不孕和流产的主要生殖系统疾病，每年造成巨大的经济损失。这种疾病主要由大肠杆菌感染引发，其细胞壁成分脂多糖（LPS）通过与Toll样受体4（TLR4）结合，激活NF-κB信号通路，导致IL-6、IL-1β等促炎因子大量释放，同时诱发细胞凋亡。近年研究发现microRNA-200b在炎症反应中起关键调控作用，但其在奶牛子宫内膜炎中的具体机制尚不明确。云南农业大学的研究团队在《Theriogenology》发表的研究成果，首次系统阐明了bta-miR-200b通过PTEN/AKT/NF-κB轴缓解LPS诱导的子宫内膜炎症损伤的分子机制。

研究人员采用组织病理学分析、Western blotting、免疫荧光染色和流式细胞术等技术，对健康与患病奶牛子宫内膜组织进行对比研究，并建立LPS诱导的牛子宫内膜上皮细胞（BEND）炎症模型。通过KEGG通路分析预测靶点关系，结合基因过表达和敲除实验验证信号通路调控机制。

【组织样本分析】比较健康与子宫内膜炎组织发现，病变组织存在明显炎性浸润和上皮细胞脱落，伴随bta-miR-200b表达下调及IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高。

【LPS浓度筛选】确定24小时100 μg/mL LPS处理可显著降低BEND细胞活力，同时重现了患病组织中bta-miR-200b的低表达特征。

【炎症调控机制】过表达bta-miR-200b能抑制LPS诱导的p65磷酸化，减少促炎因子释放，并通过提升Bcl-2/Bax比值抑制细胞凋亡。KEGG分析显示该调控涉及PI3K/AKT通路激活。

【靶点验证】证实PTEN是bta-miR-200b的直接靶标，双敲除实验显示PTEN缺失会逆转bta-miR-200b抑制对AKT磷酸化和p65核转位的保护作用。

【功能验证】免疫荧光和流式检测证实PTEN敲除可阻断bta-miR-200b抑制对LPS诱导凋亡的缓解效应。

该研究创新性地揭示了bta-miR-200b通过靶向PTEN调控AKT/NF-κB信号轴的双重保护机制：一方面抑制炎症反应，另一方面抗细胞凋亡。这不仅为理解奶牛子宫内膜炎发病机制提供了新视角，更重要的是为开发基于miRNA的靶向治疗策略奠定了理论基础。研究成果对改善奶牛繁殖性能、减少养殖业经济损失具有重要应用价值，同时为人类妇科炎症性疾病的治疗研究提供了跨物种参考。