黄芪甲苷IV通过降低氧化应激改善小鼠体外排卵后老化卵母细胞质量的研究

为解决水牛精子性别分离技术成本高、受孕率低的问题，ICAR-CIRB团队利用TLR7/8激动剂R848开发新型分选方法。研究发现0.3 μM R848处理可保持精子线粒体健康，通过胚胎性别鉴定实现75%性别特异性囊胚产出，为水牛性别控制育种提供高效解决方案。

　　

在水牛畜牧业中，雌性后代因其产奶价值备受青睐，而雄性个体则面临经济价值低的困境。传统精子分选技术存在设备昂贵（如流式细胞仪分选需25万美元/台）、受孕率降低30-40%等瓶颈，导致发展中国家难以普及。印度农业研究委员会-中央水牛研究所（ICAR-CIRB）的Mamta Meel团队在《Theriogenology》发表研究，首次将TLR7/8激动剂R848应用于水牛新鲜精液分选，开创了低成本性别控制新策略。

研究采用计算机辅助精子分析(CASA)、流式细胞术等关键技术，对3头Murrah种公牛精液进行0-3 μM R848梯度处理。免疫荧光证实TLR7/8受体在50%精子中表达，其中TLR7定位于顶体帽和尾部，TLR8分布于顶体后区和中段。0.3 μM R848使X精子运动速度(VCL/VAP/VSL)显著降低，但线粒体膜电位(ΔΨm)和超氧化物产量未受影响。体外受精实验显示，处理组与对照组囊胚率相当(21-26%)，而上层精子组囊胚中75%为雌性，下层组75%为雄性。

主要研究结果

1. TLR7/8受体定位：通过免疫荧光首次绘制出水牛精子TLR7/8的空间分布图谱，为受体功能研究提供形态学基础。
2. R848浓度优化：0.3 μM R848实现X/Y精子运动差异最大化，且不影响线粒体功能，避免传统 Percoll 梯度离心造成的氧化损伤。
3. 性别分离效率验证：胚胎性别鉴定证实该方法可实现3:1的性别偏向性，与流式分选效果相当但成本降低90%。

该研究突破性地将R848分选技术应用于新鲜精液，处理时间缩短至1小时，且无需特殊设备。相较于冷冻精液分选（存活率仅60%），新鲜精液处理保持85%以上活率，为水牛性别控制育种提供可规模化应用的解决方案。研究团队指出，该方法可整合到人工授精流程中，预计使每剂性别控制精液成本从50美元降至5美元，对印度等发展中国家畜牧业发展具有重要实践意义。讨论部分强调，未来需进一步验证该技术在体内受精中的效果，并探索TLR7/8信号通路调控精子运动的分子机制。