基于壳聚糖/β-葡聚糖黏膜黏附纳米疫苗的罗非鱼爱德华氏菌病浸泡免疫研究

为解决水产养殖中爱德华氏菌病(E. tarda)传统疫苗免疫效率低下的问题，印度科钦科技大学团队开发了壳聚糖(CS)/β-葡聚糖(BG)纳米疫苗。研究表明该疫苗通过浸泡途径显著提升罗非鱼黏膜免疫应答，使相对存活率(RPS)达68.89%，为水产疫苗非注射给药提供了创新方案。

　　

在水产养殖业蓬勃发展的今天，罗非鱼作为全球第二大养殖鱼类，正面临爱德华氏菌病(E. tarda)的严重威胁。这种革兰氏阴性菌引发的疾病可导致高达60%的死亡率，给养殖户造成巨大经济损失。传统防治依赖抗生素，但耐药性问题日益突出；而现有注射疫苗存在操作繁琐、应激反应大等缺陷。更令人担忧的是，口服疫苗易被消化酶降解，常规浸泡疫苗则因抗原吸收率低而效果欠佳。这些困境促使科学家们寻找更安全高效的免疫方案。

印度科钦科技大学的研究团队创新性地将壳聚糖(CS)的黏膜黏附特性与β-葡聚糖(BG)的免疫增强作用相结合，开发出新型纳米浸泡疫苗。这项发表在《Veterinary Immunology and Immunopathology》的研究显示，该疫苗能通过鱼鳃高效递送抗原，激活多层次的免疫防御机制。研究人员采用扫描电镜(SEM)表征纳米颗粒形态，通过qRT-PCR分析免疫基因表达，并建立攻毒实验评估保护效力。实验选用600尾健康尼罗罗非鱼，设置对照组、灭活疫苗组、CS/BG空白载体组和CS/BG疫苗组，通过两次30分钟浸泡免疫后系统检测各项指标。

【疫苗安全】
通过TSA平板培养验证细菌完全灭活，两周观察期未发现异常行为或死亡，证实制剂安全性。

【先天免疫激活】
接种后14/28天(Dpv)检测显示：溶菌酶、髓过氧化物酶、NBT(硝基蓝四氮唑)和超氧化物歧化酶活性显著升高(p<0.05)，表明纳米疫苗成功激活先天免疫系统。

【体液免疫应答】
ELISA检测发现特异性IgM抗体在14/28 Dpv出现峰值，qRT-PCR证实脾脏中IgM、TNF-α、IL-1β等免疫相关基因显著上调，显示强烈的适应性免疫激活。

【攻毒保护效力】
36 Dpv用强毒株E. tarda攻毒后，CS/BG疫苗组相对存活率(RPS)达68.89%，显著高于灭活疫苗组的48.89%，组织病理学显示免疫组仅出现轻微炎性浸润。

【作用机制探讨】
研究揭示CS纳米载体不仅能保护抗原免受水体环境破坏，其正电荷特性还促进鳃组织黏附渗透；而BG通过结合免疫细胞表面模式识别受体(PRRs)，协同增强抗原提呈和淋巴细胞活化。这种"载体-佐剂"双效系统克服了传统浸泡疫苗抗原递送效率低的瓶颈。

该研究开创性地证明生物材料纳米疫苗在鱼类非注射免疫中的巨大潜力。相较于传统方法，这种方案操作简便、无应激反应，特别适合发展中国家大规模养殖场应用。更值得关注的是，文中建立的黏膜免疫评价体系为其他水产疫苗研发提供了重要参考。虽然目前仍需开展商业化验证，但这项技术已展现出对抗多种水产病原体的应用前景，或将引领水产疫苗进入纳米递送新时代。