俄罗斯北部地区牛源Buxtonella sulcata的首次发现及其种间比较分析研究

针对俄罗斯北部地区牛源纤毛虫Buxtonella sulcata分布不明及种间鉴别困难的问题，研究人员通过形态学（免疫荧光显微术、银染法）和分子生物学（SSU/ITS序列分析）技术，首次在沃洛格达和萨哈共和国发现该病原体（感染率84%），揭示了其种间分化特征，为牛布克斯顿虫病防控提供科学依据。

　　

在牛群健康管理中，一种名为Buxtonella sulcata的肠道纤毛虫长期被忽视。这种微生物虽常见于牛和骆驼肠道，但其致病性一直存在争议——部分研究认为其感染强度与腹泻等症状呈正相关，而另一些学者则持保留态度。更棘手的是，该属另一个物种B. cameli与B. sulcata在形态和基因序列（如18S rRNA和ITS区域）上高度相似，使得粪便样本中的准确鉴别成为难题。随着联合放牧模式的推广，厘清这两个物种的宿主特异性对制定防控策略至关重要。然而，作为畜牧业大国的俄罗斯，此前竟缺乏关于B. sulcata分布的基线数据，尤其在气候严酷的北部地区。

俄罗斯科学院动物研究所（Zoological Institute of the Russian Academy of Sciences）的研究团队为此展开攻关。他们采集了沃洛格达地区32头荷斯坦奶牛和雅库特共和国5头雅库特奶牛的粪便样本，运用免疫荧光显微术、银染法观察形态特征，并结合SSU（小亚基核糖体RNA）和ITS（内转录间隔区）序列进行系统发育分析。研究发现沃洛格达牛群感染率高达84%，首次证实了俄罗斯北部两个地区存在B. sulcata感染。通过比较形态学特征和分子数据，团队成功建立了区分Buxtonella属物种的关键鉴定标准。

【关键技术方法】
研究采用现场随机采样法获取粪便样本，通过直接涂片和离心沉淀法检测滋养体和包囊。形态学分析结合了免疫荧光标记（定位特定抗原）和银浸染技术（显示纤毛器模式）。分子鉴定方面，提取DNA后扩增SSU rRNA和ITS基因区域，通过测序比对构建系统发育树。

【研究结果】

1. 样本采集与感染率：沃洛格达地区27/32样本阳性（84%），雅库特地区1/3阳性。感染强度差异显著（120-10,400细胞/mL）。
2. 形态学特征：银染显示口器纤毛列模式具有种特异性，包囊直径30-45μm，滋养体运动方式与文献记载一致。
3. 分子证据：SSU序列与已知B. sulcata株系相似度达99.2%，ITS区域变异位点可区分B. sulcata与B. cameli。

【结论与意义】
该研究首次绘制了俄罗斯北部B. sulcata的分布图谱，揭示了高纬度寒冷环境下的存活能力。建立的形态-分子联合鉴定体系（如口器纤毛模式结合ITS单核苷酸多态性）解决了种间鉴别难题。值得注意的是，雅库特样本中仅检出包囊，提示寒冷可能促使病原体进入休眠状态。这些发现为制定针对性的牧场卫生管理措施（如包囊消杀规程）提供了理论支撑，尤其对俄罗斯北部畜牧业发展具有重要实践价值。论文成果发表于《Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports》，为后续开展跨宿主传播机制研究奠定了基础。