液态富血小板纤维蛋白对口腔细胞及组织工程口腔黏膜模型的体外影响研究

本研究针对液态富血小板纤维蛋白（Liquid-PRF）在口腔软组织再生中的疗效争议，通过体外二维细胞培养和三维组织工程口腔黏膜模型，系统评估了其生物活性成分对口腔成纤维细胞、角质形成细胞及黏膜组织的影响。研究发现Liquid-PRF虽能促进二维培养中细胞迁移与增殖，但对三维模型的修复作用有限，为优化口腔再生治疗策略提供了关键实验依据。

　　

口腔软组织的再生修复一直是临床难题，传统血小板浓缩制剂如富血小板血浆（PRP）存在抗凝剂干扰等问题，而新型液态富血小板纤维蛋白（Liquid-PRF）因其无添加、缓释生长因子的特性备受关注。然而，其单独应用能否有效促进口腔黏膜再生仍缺乏机制研究。英国谢菲尔德大学（The University of Sheffield）的研究团队在《Scientific Reports》发表论文，通过创新性实验设计揭示了Liquid-PRF的生物学效应。

研究采用水平转子离心法制备Liquid-PRF，通过细胞代谢活性检测（MTT法）、迁移实验（Oris系统）和三维组织工程口腔黏膜模型（TEOM）等多维度评估体系，结合细胞因子阵列分析生长因子释放谱。实验样本来源于9名健康志愿者的外周血，并利用永生化口腔角质形成细胞系（FNB6/TERT）和原代口腔成纤维细胞（NOFs）构建研究模型。

Liquid-PRF的生物活性特征
离心分离获得的Liquid-PRF血小板浓度达680×10⁹/L，显著高于全血（245×10⁹/L）。细胞因子检测显示其富含血小板衍生生长因子（PDGF-BB）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和表皮生长因子（EGF），浓度分别为基础培养基的10倍、2.7倍和2.8倍。

二维培养中的促再生效应
在单层细胞实验中，50%浓度Liquid-PRF条件培养基使成纤维细胞增殖指数显著提升（p<0.0001），而角质形成细胞迁移速度在24小时内较对照组提高40%（p<0.01），证实生长因子对细胞行为的直接调控作用。

三维模型的差异化响应
在模拟真实黏膜结构的TEOM中，尽管Ki-67染色显示基底层上区出现增殖细胞（提示潜在分化调控），但10天培养后上皮厚度（约50μm）和代谢活性均未出现统计学显著变化（p>0.05），表明三维微环境可能削弱了生长因子的作用效率。

讨论部分指出，Liquid-PRF虽能提供关键再生信号分子，但单独应用时受限于三维组织中细胞外基质的屏障作用和生长因子时空分布差异。该研究首次在仿生模型中验证了Liquid-PRF的局限性，为临床联合应用支架材料或时序释放系统提供了理论依据。论文强调未来需开发更复杂的伤口模型，以模拟炎症、血管化等生理过程，从而全面评估血小板浓缩制剂的再生潜力。