尿液三模式即时检测技术实现高危型人乳头瘤病毒（HPV 16/18）快速筛查

本研究针对资源有限地区宫颈癌筛查难题，开发了一种基于环介导等温扩增（LAMP）与SYBR Safe-孔雀石绿（SSMG）双染料的核酸检测技术，可在45分钟内通过比色、荧光和电化学三模式检测尿液中的高危型HPV（16/18型），灵敏度达10 copies μL?1，临床验证特异性达96.2%，为偏远地区宫颈癌防控提供创新解决方案。

　　

宫颈癌作为全球第四大妇科恶性肿瘤，每年导致约35万例死亡，其中99%与高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染相关。尽管HPV 16/18型占宫颈癌病例的70%以上，但传统核酸检测依赖复杂设备和技术人员，导致90%的死亡病例集中在医疗资源匮乏地区。这一严峻现状催生了对快速、简易且低成本筛查技术的迫切需求。

Mayo Clinic（美国梅奥医学中心）的研究团队在《Biosensors and Bioelectronics: X》发表创新成果，通过耦合荧光染料SYBR Safe（SS）与显色剂孔雀石绿（MG），开发出SSMG-LAMP三模式检测系统。该技术整合DNA提取、等温扩增和信号读取流程，仅需便携式设备即可完成检测。关键技术包括：1）优化LAMP引物设计靶向HPV E6基因；2）建立SSMG双染料协同检测机制；3）开发智能手机兼容的比色/荧光分析模块；4）构建微型电化学传感器阵列。临床验证采用16例Mayo Clinic存档尿液样本进行盲测。

研究结果显示：

1. SSMG-LAMP建立：双染料系统使阴性/阳性样本色差ΔE值提升3倍，紫外吸收峰从510nm红移至630nm，电化学信号变化达显著性差异（p<0.0001）。
2. 参数优化：确定50× SS与50μM MG为最佳浓度组合，63℃反应30分钟可实现12 copies μL^?1 HPV 16检测限。
3. 性能验证：三模式检测中电化学法表现最优，AUC达0.9473（95% CI:0.8981–0.9964），特异性96.2%；荧光法成功检出临床唯一HPV 18阳性样本。
4. 临床适用性：室温保存4周的试剂仍保持90%以上活性，全程检测耗时45分钟，显著优于传统PCR。

讨论指出，该研究首次实现LAMP技术在三模式检测中的协同应用：比色法满足无设备场景需求，荧光法提升弱阳性检出率，电化学法则降低假阳性风险。尽管临床样本中出现的1例假阴性可能与DNA降解有关，但系统整体准确性达90.6%，尤其适合非洲、东南亚等低资源地区。未来可通过扩大样本量验证对其他高危型HPV（如31/33/52型）的区分能力。这项技术突破不仅为宫颈癌筛查提供新范式，其模块化设计更可拓展至HIV、寨卡病毒等病原体检测领域，推动全球公共卫生公平性发展。