NG-Test CARBA 5与Genobio K.N.I.V.O.侧向层析检测技术在碳青霉烯酶检测中的性能评估与临床应用价值

本研究系统评估了NG-Test CARBA 5（CARBA 5）和Genobio K.N.I.V.O.（Genobio）两种侧向层析检测（LFA）对碳青霉烯酶（KPC/NDM/VIM/IMP/OXA-48-like）的检测性能。结果显示，两者对肠杆菌目（Enterobacterales）、铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）和鲍曼不动杆菌（A. baumannii）的检测一致性分别达100%和98.5%，但Genobio存在IMP-8漏检和摩根菌（Morganella）交叉反应问题，为临床实验室快速检测碳青霉烯酶提供了重要数据支持。

　　

ABSTRACT

碳青霉烯酶产生菌（CPOs）感染与住院患者高死亡率密切相关。本研究评估了两种侧向层析检测（LFA）——NG-Test CARBA 5（CARBA 5）和Genobio K.N.I.V.O.（Genobio）对革兰阴性菌中碳青霉烯酶的检测性能。测试菌株包括152株临床分离株（10株鲍曼不动杆菌、12株铜绿假单胞菌和130株肠杆菌目），其中132株携带碳青霉烯酶（KPC/NDM/VIM/IMP/OXA-48-like），20株为阴性对照。结果显示，CARBA 5对肠杆菌目的阳性符合率达100%，而Genobio因漏检1株IMP-8肺炎克雷伯菌及摩根菌假阳性（NDM/OXA-48交叉反应）降至98.5%。两种LFA在非目标碳青霉酶检测中均未出现假阳性，且背景信号和检测线强度评估显示，Genobio存在更高背景干扰（41% vs 13%）。

INTRODUCTION

碳青霉烯酶耐药在全球持续蔓延，尤其肠杆菌目、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌可通过移动遗传元件传播多重耐药。传统表型检测方法（如mCIM和Carba NP）虽成本低但耗时长（需数小时），而LFA可在15分钟内完成检测。CARBA 5既往研究显示灵敏度88%-100%，但针对非肠杆菌目（如鲍曼不动杆菌）的数据有限。本研究首次系统比较两种LFA在三种病原体中的性能差异。

MATERIALS AND METHODS

152株菌株来源包括CDC/FDA耐药菌库（111株）和多伦多圣迈克尔医院临床分离株（41株）。所有菌株经PCR确认碳青霉酶基因后，使用标准接种环取菌悬液进行LFA检测。额外评估了背景显色（无/弱/强）和检测线强度（明亮/微弱），并由4名操作者进行重复性验证。

RESULTS

1. 检测性能：

   • 肠杆菌目中，CARBA 5对KPC/NDM/OXA-48/VIM/IMP的检测均无漏检，而Genobio漏检1株IMP-8肺炎克雷伯菌，并在摩根菌中误报NDM/OXA-48阳性。
   • 鲍曼不动杆菌（NDM）和铜绿假单胞菌（KPC/VIM/IMP）检测中，两者均达100%符合率。
   • 重复性实验显示两种LFA结果稳定（100%一致）。

2. 实操因素：

   • 50株黏液型菌株中，CARBA 5对1株高度黏液型肺炎克雷伯菌产生无效结果，而Genobio无此问题。
   • 背景干扰分析显示，CARBA 5的87%检测无背景显色，而Genobio仅59%；检测线微弱现象主要见于NDM生产者（占比75%）。

DISCUSSION

本研究揭示了LFA在临床实践中的优势与局限：

• 优势：CARBA 5对IMP变体的广谱检测能力（如IMP-8）优于Genobio，且背景干扰更低；
• 风险点：Genobio在摩根菌中易出现NDM/OXA-48假阳性，可能与接种量相关（文献支持接种量越高假阳性率越高）；
• 临床应用：建议实验室对LFA阴性但美罗培南耐药的肠杆菌目补充分子检测（如SME/GES/IMI基因）。

创新与不足

首次系统评估LFA在黏液型菌株中的表现，但IMP变体覆盖范围有限（仅6株），且未纳入新兴碳青霉酶（如GES）。未来需扩大样本量以验证LFA对非典型菌株的适用性。