马立克病病毒Meq蛋白氨基酸插入加速肿瘤发生的分子机制研究

这篇研究揭示了马立克病病毒（MDV）致癌蛋白Meq中59/60个氨基酸的插入（L-Meq）通过增强其蛋白稳定性及转录激活活性（如bcl-2、cd30和icp4启动子），促进CD4+T细胞早期转化，从而加速禽类淋巴瘤进程。研究结合报告基因实验、重组病毒（vRB-1B_L-Meq）体内感染模型及RNA-seq分析，为MDV毒力进化机制提供了新见解。

　　

氨基酸插入增强Meq蛋白的转录激活活性
研究团队通过构建RB-1B株马立克病病毒（MDV）的Meq蛋白变体，发现L-Meq（含59/60个氨基酸插入）相较于标准Meq显著增强了对bcl-2、cd30和icp4启动子的转录激活能力。报告基因实验显示，L-Meq（RB-1B）对bcl-2启动子的激活强度是Meq的1.8倍，而对pp38/pp14启动子的抑制活性不变。Western blot进一步揭示插入序列通过增加脯氨酸富集区（PRRs）延缓蛋白降解，半衰期延长至12小时（Meq仅3小时），这解释了其持续激活靶基因的机制。

重组病毒的体内致病性分析
利用细菌人工染色体（BAC）技术构建的重组病毒vRB-1B_L-Meq在感染鸡模型中表现出更早的疾病进展。感染28天后，其血液病毒载量较vRB-1B_Meq组高3倍，死亡率提升40%。流式细胞术显示，vRB-1B_L-Meq组CD4⁺T细胞比例在感染14天即显著上升（较对照组增加25%），并伴随膜结合型TGF-β⁺（mTGF-β⁺）调节性T细胞亚群的早期扩增，提示肿瘤转化进程加速。

免疫细胞动态与肿瘤微环境特征
CD8αβ⁺和γδ T细胞在vRB-1B_L-Meq感染早期（7-14天）短暂升高后急剧下降，而CD8αα⁺记忆T细胞在35天显著增加，但未能有效清除转化细胞。RNA-seq分析显示，两组肿瘤病灶的转录组高度相似（Spearman相关系数r>0.95），但L-Meq组富集了T细胞增殖（如il15、cd28）和趋化因子（如cxcr5）相关基因，而Meq组则上调脂代谢通路（如cox1/cox2）。

临床意义与进化启示
该研究首次阐明L-Meq通过“加速转化”而非“改变转化路径”增强MDV毒力。值得注意的是，疫苗株CVI988虽携带L-Meq，但因其他位点突变（如碱性区多态性）削弱了其转录活性，这为设计新型减毒疫苗提供了靶点。研究还提示，Meq蛋白稳定性可能影响抗原呈递效率，为肿瘤免疫逃逸机制研究开辟了新方向。